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3. Methoden 64<br />
Tabelle 11: Parameter des Kryomikrotoms zur Herstellung von Gel- und Gewebeschnitten<br />
Klingentemperatur -22 °C<br />
Probentischtemperatur -20 °C<br />
Umgebungstemperatur -20 °C<br />
Klingenmaterial<br />
Kohlenstoffstahl<br />
Durch die Verwendung eines Klebebandes (Scotch® Klebeband 821, 3M)<br />
wurde ein Zerbrechen der Probe aufgrund des hohen Wassergehaltes verhindert<br />
[URGAST et al. 2012]. Das Klebeband wurde mit einer Keramikschere in eine<br />
annähernd gleiche Dimension wie der Grundfläche des Kalibrationsstandards<br />
geschnitten und kurz vor dem Schneiden aufgetragen. Der angefertigte<br />
Acrylamidschnitt war auf dem Klebeband fixiert, wodurch die Herstellung einer<br />
gleichmäßig geschnittenen Probe gesichert werden konnte. Ohne das Klebeband<br />
kam es häufig aufgrund der großen Scherkräfte zur Komprimierung des<br />
Probenschnittes, wodurch eine ungleichmäßige Schichtdicke resultierte. Dies<br />
führt zu einer ungenauen und fehlerbehafteten Kalibration.<br />
Der auf dem Klebstoff haftende Standard wird anschließend auf einem mit<br />
doppeltseitigem Klebeband überzogenen Objektträger fixiert und in eine<br />
Aufbewahrungsbox auf dem Stickstoff gekühlten Aluminiumblock gelegt.<br />
Das LA-ICP-MS wurde wie in Kapitel 3.3.1 beschrieben vollständig mit Helium<br />
gespült und auf maximale Intensität eingestellt. Die Kryoablationskammer<br />
wurde auf -15°C temperiert, so dass die Proben in gefrorenen Zustand abliert<br />
wurden. Für die Quantifizierung wurde eine Linienablation mit Startpunkt am<br />
Ablationskammereingang in Richtung zum Ablationskammerausgang<br />
vermessen. Die LA-ICP-MS Messparameter sind Tabelle 12 zu entnehmen.