(19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) - Questel
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IBR로부터 유래되는 항원의 최적화는 "신호" 서열, 특히 인간 기원의 tPA 신호 서열에 의한, 당단백질 gB 및/또<br />
는 당단백질 gC 및/또는 당단백질 gD의 신호 펩타이드 서열의 치환, 및/또는 gB 및/또는 gC 및/또는 gD의 막관<br />
통 도메인을 코딩하는 DNA 단편의 결실에 의해 수행된다. 이들 당단백질 중 하나의 막관통 도메인을 코딩하는<br />
DNA 단편의 결실은 연속된 C-말단 부분(당단백질의 세포질 부분)에 의해 달성되는 것이 바람직하다. 따라서,<br />
본 발명에 따르는 IBR에 대한 DNA 백신은 최적화된 IBR 항원 중 하나(gB, gC 또는 gD), 혹은 이들 중 둘 또는<br />
셋 모두, 즉 최적화된 gB, 최적화된 gC 및 최적화된 gD를 코딩하고 발현시킬 수 있다.<br />
다양한 발현 벡터 구조체 및 본 발명에 사용될 수 있는 IBR 항원을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열은 하기 실시<br />
예 및 FR-A1-275<strong>12</strong>29, 보다 구체적으로 실시예 7 및 실시예 8 그리고 도 3 및 도 4에 제시되어 있다.<br />
본 발명에 따르면, BHV-1에 대한 DNA 백신은 DMRIE-DOPE와 함께 제형화되고, 막관통 도메인을 코딩하는 뉴클레<br />
오타이드 서열의 단편과 연속된 C-말단 부분 단편의 결실에 의해 최적화된 BHV-1 gB 항원을 코딩하는 발현 플라<br />
스미드(예를 들면, pPB281 실시예 3.1.2), 막관통 도메인을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열의 단편과 연속된 C-<br />
말단 부분 단편의 결실에 의해 최적화된 BHV-1 gC 항원을 코딩하는 제2 발현 플라스미드(예를 들면, pPB292 실<br />
시예 3.2.2), 그리고 막관통 도메인을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열의 단편과 연속된 C-말단 부분의 결실에 의<br />
해 최적화된 BHV-1 gD 항원을 코딩하는 제3 발현 플라스미드(예를 들면, pPB284 실시예 3.3.2)로 구성되는 것이<br />
바람직하다.<br />
일반적으로 BHV-1에 대해서만 제한되지 않고, 막관통 도메인을 코딩하는 서열과 인접한 C-말단 부분은 보존될<br />
수 있다. 그러나, 이 부분은 흔히 막관통 도메인을 코딩하는 서열과 동시에 결실되기 쉽다.<br />
본 발명의 대상은 또한 소에서 소 호흡기합포체 바이러스(BRSV)에 대해 유효한 방어 면역반응을 유도할 수 있는<br />
개선된 DNA 백신이다.<br />
BRSV 바이러스는 Paramyxoviridae과의 일원인 파라믹소바이러스이다(Baker et al., Vet. Clin. North Am. Food<br />
Anim. Pract., <strong>19</strong>97, 13, 425-454). F 단백질 및 G 당단백질을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열은 공지되어 있<br />
으며, 수탁 번호 Y17970 및 U33539 하에 GenBank 데이터베이스로부터 입수 가능하다.<br />
BRSV에 대한 DNA 백신은 본 발명에 따르는 면역 보강제, 특히 DMRIE, 바람직하게는 DMRIE-DOPE와 함께 제형화하<br />
여 개선시키는 것이 바람직하다. 선택적으로, 이는 소 GM-CSF의 부가 또는 적어도 하나의 BRSV 항원의 최적화<br />
중 하나, 또는 궁극적으로 소 GM-CSF의 부가 및 적어도 하나의 BRSV 항원의 최적화와 조합될 수 있다.<br />
소 GM-CSF의 부가는 BHV-1에 대해 기재한 바와 같이 수행할 수 있다.<br />
BRSV로부터 유래되는 항원의 최적화는 "신호" 서열, 특히 인간 기원의 tPA 신호 서열에 의한, BRSV의 F 단백질<br />
및/또는 BRSV의 G 외피 당단백질의 신호 서열의 치환, 및/또는 F 및/또는 G의 막관통 도메인을 코딩하는 DNA 단<br />
편의 결실에 의해 수행된다. 이들 단백질 중 하나의 막관통 도메인을 코딩하는 DNA 단편의 결실은 연속된 C-말<br />
단 부분에 의해 달성되는 것이 바람직하다. 따라서, 본 발명에 따르는 BRSV에 대한 DNA 백신은 최적화된 BRSV<br />
항원 중 하나(F 또는 G) 또는 이들 둘 모두(F 및 G)를 코딩하고 발현시킬 수 있다.<br />
다양한 발현 벡터 구조체 및 본 발명에 사용될 수 있는 BRSV 항원을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열은 하기 실시<br />
예 및 FR-A1-275<strong>12</strong>29, 보다 구체적으로 실시예 9 및 실시예 10 그리고 도 5 및 도 6에 제시되어 있다.<br />
본 발명에 따르면, BRSV에 대한 DNA 백신은 DMRIE-DOPE와 함께 제형화되고, F의 신호 서열 대신 인간 tPA의 신<br />
호 서열의 삽입 및 막관통 도메인을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열의 단편과 연속된 C-말단 부분 단편의 결실에<br />
의해 최적화된 BRSV의 F 항원을 코딩하는 발현 플라스미드(예를 들면, pS<strong>B1</strong>14 실시예 4.1.2), 그리고 G의 신호<br />
서열 대신 인간 tPA의 신호 서열의 삽입 및 막관통 도메인을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열의 단편과 연속된 C-<br />
말단 부분 단편의 결실에 의해 최적화된 BRSV의 G 항원을 코딩하는 제2 발현 플라스미드(예를 들면, pS<strong>B1</strong>10 실<br />
시예 4.2.2)로 구성되는 것이 바람직하다.<br />
본 발명의 대상은 또한 소에서 BVDV 바이러스에 대항하여 유효한 방어 면역반응을 유도할 수 있는 개선된 DNA<br />
백신이다.<br />
BVDV 바이러스는 Flaviviridae과의 페스티바이러스이다. 이 바이러스는 소 무리군 도처에 분포하며, 기형, 유<br />
산 또는 임상적인 호흡기(비강 질환) 및 위장(소 바이러스성 설사) 증후군에 의해 나타난다.<br />
BVDV 바이러스는 임상 증상의 경중에 의해 구별되며, BVDV 타입 1(불분명하거나 가벼운 임상 징후) 및 BVDV 타<br />
입 2(급성 임상 징후, 출혈, 높은 질병률 및 높은 사망률)의 두 그룹으로 이루어진다(Dean H.J. 및 Leyh R.,<br />
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등록특허 10-0820893
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