(19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) - Questel
(19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) - Questel
(19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) - Questel
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
다.<br />
이렇게 변형된 bPI-3 F 유전자(β-글로빈 tPA-F Δ[TM-Cter])는 504개 아미노산의 단백질을 코딩한다.<br />
실시예 8: 다양한 형태의 유사광견병 바이러스(PRV) 항원을 코딩하는 플라스미드<br />
PRV 당단백질 gB, gC 및 gD를 코딩하는 유전자는 NIA3 균주(M. Riviere et al., J. Virol. 66, 3424-3434; A.<br />
Baskerville et al., The Veterinary Bulletin, <strong>19</strong>73, 43 No. 9)의 바이러스 DNA로부터 PCR하여 얻었다. PRV<br />
NIA3 균주의 돌연변이를 사용할 수도 있으며, 이는 France Paris 소재의 Collection National de Cultures de<br />
Microorganismes(CNCM), Institute Pasteur에 참고번호 I-351 및 I352 하에 기탁되어 있다.<br />
8.1 다양한 형태의 PRV gB를 코딩하는 플라스미드<br />
8.1.1. pS<strong>B1</strong>01: 벡터 pVR10<strong>12</strong> 내로 클로닝된 gB 유전자(천연 형태)<br />
PRV NIA3 균주의 gB 유전자를 하기 프라이머를 이용하고 주형으로서 바이러스 DNA를 이용해 PCR하여<br />
증폭시켰다:<br />
SB201(36량체; SEQ ID NO 55)<br />
SB202(39량체; SEQ ID NO 56)<br />
증폭 산물(2766 bp)을 효소 EcoRV 및 BamHI을 이용해 분해시키고, EcoRV 및 BamHI으로 사전 분해된 벡터<br />
pVR10<strong>12</strong>(실시예 2)에 결찰시켜 약 7631 bp 크기의 플라스미드 pS<strong>B1</strong>01을 제작하였다.<br />
PRV gB 유전자는 913개 아미노산의 당단백질을 코딩한다.<br />
8.1.2 pS<strong>B1</strong>02: 벡터 pVR10<strong>12</strong> 벡터 내로 클로닝된 gB 유전자(Δ[TM-Cter] 형태)<br />
PRV NIA3 균주의 gB 유전자의 절단된 형태를 하기 프라이머를 이용하고 주형으로서 바이러스 DNA를 이용해 PCR<br />
하여 증폭시켰다:<br />
SB201(SEQ ID NO 55) 및<br />
SB203(39량체; SEQ ID NO 57)<br />
증폭 산물(2262 bp)을 효소 EcoRV 및 BamHI을 이용해 분해시키고, EcoRV 및 BamHI으로 사전 분해된 벡터<br />
pVR10<strong>12</strong>(실시예 2)에 결찰시켜 약 7142 bp 크기의 플라스미드 pS<strong>B1</strong>02를 제작하였다.<br />
gB 유전자의 절단된 형태(Δ[TM-Cter])는 PVR gB 당단백질의 세포외 도메인을 함유하는 750개 아미노산의 당단<br />
백질을 코딩한다.<br />
8.1.3 pNS009: 벡터 pA<strong>B1</strong>10 내로 클로닝된 gB 유전자(tPA Δ[TM-Cter] 형태)<br />
PRV NIA3 균주의 gB 유전자의 tPA Δ[TM-Cter] 형태를 하기 프라이머를 이용해 주형 pS<strong>B1</strong>01(실시예 8.1.1)로부<br />
터 PCR하여 증폭시켰다:<br />
SB203(SEQ ID NO 57) 및<br />
SB217(39량체; SEQ ID NO 58)<br />
증폭 산물(2088 bp)을 EcoRV 및 BglⅡ를 이용해 분해시키고, EcoRV 및 BglⅡ으로 사전 분해된 벡터 pA<strong>B1</strong>10(실<br />
시예 2) 내로 클로닝하여 약 7<strong>12</strong>7 bp 크기의 플라스미드 pNS009를 제작하였다.<br />
gB 유전자의 tPA Δ[TM-Cter] 형태는 PRV gB 당단백질의 세포외 도메인을 함유하는 720개 아미노산의 당단백질<br />
을 코딩한다.<br />
- 27 -<br />
등록특허 10-0820893
Change language