Ponencias, comunicaciones y pósteres

4. PROCEDIMIENTO.
4.1. Muestras.
En este estudio se contó con 32 ejemplares de muestra de tejido adiposo subcutáneo de
cerdo Ibérico, almacenadas en bolsas de plástico precintadas en condiciones de congelación
hasta el momento del análisis. Cada ejemplar de muestra estaba formado por láminas o tiras
de cada uno de los trozos de los animales muestreados de un lote de sacrificio (Orden
PRE/3844/2004). Los ejemplares de muestras fueron suministrados por el Consejo Regulador
de la Denominación de Origen Guijuelo (C.R.D.O.G.) y estaban clasificados como bellota,
recebo, cebo y cebo graso. Esta clasificación se efectúo teniendo en cuenta los informes de
campo y de explotación de las visitas de control realizadas por el personal del C.R.D.O.G., y
de los controles analíticos obtenidos tras el sacrificio mediante el método de análisis de la
Orden PRE/3844/2004.
De cada ejemplar de muestra se realizó un análisis a cada una de las láminas o tiras
que lo formaba, quedando la población de muestreo como se muestra en la tabla 1.
Tabla 1. Número de muestras analizadas por grupo de alimentación.
Bellota Recebo Cebo Cebo graso Total
Nº de muestras 213 192 170 15 590
4.2. Procedimiento.
4.2.1. Preparación de muestras.
De cada una de las láminas de tejido adiposo subcutáneo, se obtuvo una tira mediante
un corte de 0.2 a 0.5 cm en el centro de la lámina, conservando piel y magro. A las tiras
obtenidas se las eliminó únicamente la piel y el magro, y se picaron en pequeños trozos antes
de iniciar la obtención de lípidos totales.
4.2.2. Extracción.
La muestra picada se introducía en una bolsa con filtro, se le adicionaban 50 ml de
éter dietílico y se colocaba en un homogeneizador de palas durante 2 minutos. Transcurrido el
tiempo de extracción, el contenido de la bolsa se filtraba a un matraz de fondo redondo de 100
ml para separar el extracto del residuo sólido. El matraz con el extracto se llevaba a un
rotavapor, bajo vacío y con baño de agua entre 40-50 ºC, hasta la eliminación del disolvente.
Una alícuota de los lípidos contenidos en el matraz se utilizó para la preparación de los ésteres
metílicos, y el resto de la grasa se trasvasó a un tubo de 5 ml para conservar en congelación.
4.2.3. Preparación de ésteres metílicos.
La cuantificación de los ácidos grasos se llevó a cabo mediante una transesterificación
en medio básico para obtener los ésteres metílicos. Para ello, de los lípidos totales obtenidos,
se pesaban aproximadamente 0.20 g en un tubo de ensayo, se adicionaban 4 ml de hexano y
se agitaba hasta disolución de la grasa. A continuación, se añadían 0.2 ml de solución
metanólica de KOH 2M y se volvía a agitar. Se dejaba en reposo 30 minutos y se centrifugaba
30 s a 2000 rpm. A continuación, se tomaban, con pipeta Pasteur, aproximadamente 2 ml de
la fase superior, y se llevaban a un vial de cromatografía.
4.2.4. Análisis cromatográfico.
La composición de ésteres metílicos de ácidos grasos (FAMEs) se analizó mediante
cromatografía de gases utilizando un cromatógrafo modelo 6890 de Agilent Technologies,
equipado con automuestreador, sistema de inyección con división de flujo y un detector de
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BLOQUE I: PRODUCCIÓN ANIMAL
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