CIENCIA - Revista hispano-americana de Ciencias puras y aplicadas
CIENCIA - Revista hispano-americana de Ciencias puras y aplicadas
CIENCIA - Revista hispano-americana de Ciencias puras y aplicadas
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
<strong>CIENCIA</strong><br />
El proceso <strong>de</strong> purificación <strong>de</strong>be estar acompañado<br />
por un incremento en la actividad <strong>de</strong>l virus<br />
por unidad <strong>de</strong> masa <strong>de</strong>l material purificado.<br />
Hay que tener en cuenta, sin embargo, que este<br />
incremento proporcional no siempre pue<strong>de</strong> presentarse,<br />
ya que es posible existan pérdidas<br />
ocasionales en la actividad durante el proceso<br />
<strong>de</strong> purificación (inactivación, agregación irreversible,<br />
adsorsión). Ya que todos los virus están<br />
compuestos en su mayor parte por proteína,<br />
se acostumbra evaluar la disminución <strong>de</strong> material<br />
extraño al virus durante el curso <strong>de</strong> purificación,<br />
por medio <strong>de</strong> la <strong>de</strong>terminación a diferentes<br />
estadías, <strong>de</strong>l número <strong>de</strong> dosis infecciosas<br />
por mg <strong>de</strong> N proteico. Un incremento en el<br />
título <strong>de</strong>l virus por mg <strong>de</strong> N proteico indicaría<br />
separación <strong>de</strong> proteínas no infecciosas.<br />
Los métodos empleados en la separación y<br />
"purificación" <strong>de</strong> virus son tomados <strong>de</strong> los utilizados<br />
en la química <strong>de</strong> proteínas. Por lo tanto,<br />
se pue<strong>de</strong>n emplear métodos químicos tales como<br />
la adición <strong>de</strong> gran<strong>de</strong>s concentraciones <strong>de</strong> sales<br />
muy solubles, como sulfato <strong>de</strong> amonio, o bien<br />
es posible precipitar los virus añadiendo etanol<br />
o metanol, o simplemente ajustando el pH <strong>de</strong>l<br />
medio al punto <strong>de</strong> solubilidad mínima (punto<br />
isoeléctrico). Otro método utilizado en la separación<br />
<strong>de</strong> virus es la adsorción <strong>de</strong> las partículas<br />
<strong>de</strong> virus con precipitados coloidales <strong>de</strong> Al (OHh<br />
o CaSO .. y eluyendo <strong>de</strong>spués con soluciones reguladoras<br />
apropiadas. El sulfato <strong>de</strong> protamina<br />
también se utiliza para la separación y purificación<br />
parcial <strong>de</strong> varios virus. Las partículas <strong>de</strong><br />
virus <strong>de</strong> tamaño gran<strong>de</strong> son precipitadas con este<br />
tratamiento, mientras que las partículas <strong>de</strong><br />
tamaño menor <strong>de</strong> 50 mil permanecen en el fluído<br />
sobrenadan te.<br />
Recientemente se ha hecho uso <strong>de</strong> resinas <strong>de</strong><br />
intercar,nbio i¿mico para separar y purificar parcialmente<br />
varios virus. Se pue<strong>de</strong>n usar resinas<br />
anióni