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CIENCIA - Revista hispano-americana de Ciencias puras y aplicadas

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<strong>CIENCIA</strong><br />

El proceso <strong>de</strong> purificación <strong>de</strong>be estar acompañado<br />

por un incremento en la actividad <strong>de</strong>l virus<br />

por unidad <strong>de</strong> masa <strong>de</strong>l material purificado.<br />

Hay que tener en cuenta, sin embargo, que este<br />

incremento proporcional no siempre pue<strong>de</strong> presentarse,<br />

ya que es posible existan pérdidas<br />

ocasionales en la actividad durante el proceso<br />

<strong>de</strong> purificación (inactivación, agregación irreversible,<br />

adsorsión). Ya que todos los virus están<br />

compuestos en su mayor parte por proteína,<br />

se acostumbra evaluar la disminución <strong>de</strong> material<br />

extraño al virus durante el curso <strong>de</strong> purificación,<br />

por medio <strong>de</strong> la <strong>de</strong>terminación a diferentes<br />

estadías, <strong>de</strong>l número <strong>de</strong> dosis infecciosas<br />

por mg <strong>de</strong> N proteico. Un incremento en el<br />

título <strong>de</strong>l virus por mg <strong>de</strong> N proteico indicaría<br />

separación <strong>de</strong> proteínas no infecciosas.<br />

Los métodos empleados en la separación y<br />

"purificación" <strong>de</strong> virus son tomados <strong>de</strong> los utilizados<br />

en la química <strong>de</strong> proteínas. Por lo tanto,<br />

se pue<strong>de</strong>n emplear métodos químicos tales como<br />

la adición <strong>de</strong> gran<strong>de</strong>s concentraciones <strong>de</strong> sales<br />

muy solubles, como sulfato <strong>de</strong> amonio, o bien<br />

es posible precipitar los virus añadiendo etanol<br />

o metanol, o simplemente ajustando el pH <strong>de</strong>l<br />

medio al punto <strong>de</strong> solubilidad mínima (punto<br />

isoeléctrico). Otro método utilizado en la separación<br />

<strong>de</strong> virus es la adsorción <strong>de</strong> las partículas<br />

<strong>de</strong> virus con precipitados coloidales <strong>de</strong> Al (OHh<br />

o CaSO .. y eluyendo <strong>de</strong>spués con soluciones reguladoras<br />

apropiadas. El sulfato <strong>de</strong> protamina<br />

también se utiliza para la separación y purificación<br />

parcial <strong>de</strong> varios virus. Las partículas <strong>de</strong><br />

virus <strong>de</strong> tamaño gran<strong>de</strong> son precipitadas con este<br />

tratamiento, mientras que las partículas <strong>de</strong><br />

tamaño menor <strong>de</strong> 50 mil permanecen en el fluído<br />

sobrenadan te.<br />

Recientemente se ha hecho uso <strong>de</strong> resinas <strong>de</strong><br />

intercar,nbio i¿mico para separar y purificar parcialmente<br />

varios virus. Se pue<strong>de</strong>n usar resinas<br />

anióni

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