Remerciements Remerciements

tel-00769943, version 1 - 4 Jan 2013
de l’activation du système oxydasique, le cytochrome b558 contenu dans les
granulations spécifiques est transféré vers les membranes plasmique et
phagosomale [DeLeo 1996]. Le cytochrome b558 est également le point d’ancrage
des autres composants de la NADPH oxydase après stimulation. Dans le PN stimulé,
il intervient dans l’organisation du complexe actif par interaction de ses domaines
cytosoliques avec les sous-unités cytosoliques en particulier la p47 PHOX [Rotrosen
1990], la p67 PHOX [Dang 2001a, Dang 2002] et Rac 2 [Babior 2002].
I.2.1.a- La gp91 PHOX / NOX2
La gp91 PHOX / NOX2 est la sous-unité catalytique du complexe enzymatique NOX2.
Le gène codant pour la gp91 PHOX a été cloné par Royer-Pokora [Royer-Pokora
1986] et Teahan [Teahan 1987] vers la fin des années 80. Ce gène, CYBB
(Cytochrome b558 Beta chain), de 30kb et formé de 13 exons est situé sur le
chromosome X dans la région Xp21.1. L’ARN messager (ARNm) qui lui est
spécifique fait 5kb. Le produit de cet ARNm est une protéine de 570 acides aminés
ayant un point isoélectrique (PI) égal à 9.
La protéine NOX2 est d’abord synthétisée comme une protéine de 58 kDa puis en
tant que précurseur glycosylé de 65kDa dans le réticulum endoplasmique, appelé
gp65. Seule une partie de la gp65 synthétisée est transformée en gp91 PHOX ou NOX2
mature. La synthèse de NOX2 et son association avec la p22 PHOX , constituent une
étape importante de la maturation du cytochrome b558 dans les cellules
phagocytaires [Zhen 1993, Yu 1997]. Par ailleurs, il est connu que l’absence de l’une
(NOX2 ou la p22 PHOX ) chez les patients atteints de CGD entraine l’absence de
l’autre, suggérant un rôle stabilisateur des deux protéines [Yu 1998].
L’alignement de la séquence de la gp91 PHOX /NOX2 avec les membres de la famille
des ferrédoxines réductases prédit une structure topologique comprenant 6 hélices α
transmembranaires notées de I à VI dans la partie N-terminale et une région
cytoplasmique contenant les sites de fixation pour la Flavine Adénine Dinucléotide
(FAD) [Babior 1977, Sumimoto 1992, Nisimoto 1995] et le NADPH [Doussiere
1993] dans la partie C-terminale (Figure 4). Les sites de liaison potentiels du FAD
sont localisés au niveau des acides aminés 338 HPFTLSA 342 et 354 IRIVGD 359
[Rotrosen 1992, Segal 1992, Sumimoto 1992] alors que ceux du NADPH sont
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