Remerciements Remerciements

tel-00769943, version 1 - 4 Jan 2013
souris dont la moelle osseuse a été reconstituée par des cellules progénitrices
exprimant la p40 PHOX mutée au niveau de la thréonine 154 (T154A, mutant non
phosphorylable) produisent significativement moins de FRO en réponse au fMLF
(40% moins), aux globules rouges opsonisés par des IgG (67% moins) ou à S.aureus
opsonisé par le sérum (63% moins) que ceux exprimant la p40 PHOX sauvage. Cette
perte d’activité est associée à une diminution de la translocation de la p47 PHOX à la
membrane suggérant que la phosphorylation de la thréonine 154 de la p40 PHOX est
un signal physiologique important pour l’assemblage et l’activation de la NADPH
oxydase du neutrophile [Chessa 2010].
I.3.1.d-Phosphorylation de la gp91 PHOX / NOX2
Dès 1988, l’analyse des protéines phosphorylées dans les neutrophiles normaux et
les neutrophiles de patients atteints de CGD, autosomale ou liée à l’X, a suggéré que
la gp91 PHOX était phosphorylée après la stimulation des PNs [Garcia 1988]. Mais ce
n’est qu’en 2009 que cette phosphorylation a été clairement démontrée et
caractérisée grâce à l’utilisation d’anticorps spécifiques. Notre équipe a ainsi mis en
évidence la phosphorylation de la gp91 PHOX /NOX2 au cours de l’activation des PNs
humains par le PMA, le fMLF ou le zymosan opsonisé (un dérivé de la paroi de la
levure S.cerevisiae). Cette phosphorylation n’est pas détectée dans les neutrophiles
des patients atteints de CGD liée à une déficience en gp91 PHOX confirmant ainsi
l’identité de la protéine phosphorylée. La phosphorylation de la gp91 PHOX (ou NOX2)
est médiée par les PKC qui ciblent des résidus sérines et thréonines localisés dans
la partie cytosolique C-terminale de la protéine et a pour conséquences
l’augmentation de l’interaction de NOX2 avec ses partenaires cytosoliques à savoir la
p47 PHOX , la p67 PHOX et Rac2 mais aussi la potentialisation de l’activité diaphorase du
complexe [Raad 2009]. Par conséquent, la phosphorylation de la sous unité
catalytique Nox2 constitue un nouveau mécanisme de régulation de l’activité de la
NADPH oxydase.
I.3.1.e-Phosphorylation de la p22 PHOX
L’étude de l’activation de la NADPH oxydase phagocytaire en système acellulaire a
révélé que l’ajout d’acide phosphatidique dans le mélange réactionnel entraîne la
phosphorylation de la p22 PHOX . Cette phosphorylation fait intervenir des PKC
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