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tel-00769943, version 1 - 4 Jan 2013
l’incubation de fractions membranaires avec des fractions cytosoliques de PN
[Bromberg 1985] en présence d’agents activateurs comme l’acide arachidonique ou
le Sodium Dodécyl Sulfate (SDS) a conduit à la découverte de la p67 PHOX et de la
p47 PHOX . Ainsi, contrairement aux cytosols de PNs d’individus sains, les cytosols
provenant de PNs de malades atteints de formes autosomales (non liées au
chromosome X) de CGD n’induisent pas d’activité de production de FRO malgré la
fonctionnalité des fractions membranaires qui leur sont associées. Ce défaut
d’activité est lié à l’absence de l’une ou l’autre des protéines cytosoliques de NOX2
[Nunoi1988, Volpp 1988] à savoir la p47 PHOX ou la p67 PHOX .
I.2.2.a-La p47 PHOX
La p47 PHOX est le produit du gène NCF-1 (Neutrophil Cytosolic Factor 1) de taille 17-
18kb, formé de 9 exons et situé dans la région 7q11.23 du chromosome 7. Le
transcrit de ce gène est un ARNm de 1.4kb exprimé essentiellement dans les cellules
phagocytaires.
La p47 PHOX est formée de 390 acides aminés, a un poids moléculaire apparent de
47kDa et possède un PI avoisinant les 10. A l’état de repos du neutrophile, elle est
présente dans le cytosol sous deux formes: une forme libre et une forme complexée
avec la p67 PHOX et la p40 PHOX (à un rapport 1:1:1) [Park 1992, Lyer 1994, Lapouge
2002].
Cette protéine basique est composée d’un domaine PX, pour Phox Homology,
(séquence conservée d’environ 120 acides aminés intervenant dans la liaison aux
phospholipides) qui lui permet de lier les phosphoinositides [Ago 2001] notamment
les phosphatidylinositols(3,4)-bisphosphates (PtdIns(3,4)P2) produits par la
phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) suite à la stimulation des PNs [Kanai 2001,
Karathanassis 2002], d’un tandem de domaines SH3 (SH3: domaine d’environ 60
acides aminés assurant les liaisons protéine-protéine par interaction avec les
séquences PRR) qui est impliqué dans l’interaction avec le domaine PRR de la
p22 PHOX [Leto 1994, Leusen, 1994, Groemping 2003], d’une région auto-inhibitrice
(AIR) qui prévient l’interaction avec la p22 PHOX tant que la p47 PHOX n’est pas
phosphorylée [Ago 2003, Peng 2003] et enfin d’un domaine PRR qui lui permet
d’interagir avec son partenaire: la p67 PHOX [Finan 1994] (Figure 7).
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