Remerciements Remerciements

tel-00769943, version 1 - 4 Jan 2013
La p47 PHOX est dite sous-unité “organisatrice” car c’est elle qui est responsable de la
translocation du complexe protéique cytosolique (p47 PHOX -p67 PHOX -p40 PHOX ) vers la
membrane et ce grâce à ses interactions: avec les lipides membranaires et avec la
p22 PHOX d’une part et avec la p67 PHOX d’autre part. En effet, les PN de patients CGD
déficients en p47 PHOX montrent une absence de translocation de la p67 PHOX et de la
p40 PHOX vers la membrane [Heyworth 1991, Dusi 1996].
I.2.2.b-La p67 PHOX
La p67 PHOX est le produit du gène NCF-2 (Neutrophil Cytosolic Factor 2) situé dans la
région 1q25 du chromosome1. Ce gène fait 40kb, contient 16 exons et est transcrit
en un ARNm de 2.4kb codant pour une protéine non glycosylée de 526 acides
aminés [franke 1990] et ayant un poids moléculaire apparent de 67kDa. La p67 PHOX
a un PI d’environ 6.
Elle possède 4 motifs TPR (TetratricoPeptide Repeats) [Ponting 1996], un domaine
d’activation AD (AD pour Activation Domain), une région PRR, un domaine PB1, pour
Phox and Bem1, et deux domaines SH3 localisés dans la partie centrale et C-
terminale de la protéine (Figure 8). Ces domaines lui permettent notamment
d’interagir avec les autres sous-unités composant NOX2.
Les 4 motifs TPR (TPR: séquence d’une trentaine d’acides aminés où le profil des aa
hydrophobes est conservé, ce qui constitue une poche pour les interactions protéine-
protéine) de la p67 PHOX sont nécessaires à l’interaction avec la petite protéine G Rac
1 / 2; notamment le résidu arginine 102 localisé dans le troisième motif semble
important car il permet d’établir une liaison ionique avec Rac1/2 [Koga 1999]. Le
domaine AD est une séquence de 11 acides aminés (résidus 199 - 210) qui est
requise pour l’activation de NOX2 [Han 1998] et qui a été impliquée dans la
régulation du transfert des électrons par le cytochrome b558 [Nisimoto 1999]. En
effet la mutation en alanine des résidus localisés dans ce domaine, notamment la
valine 204, altère le transfert des électrons du NADPH vers le FAD diminuant ainsi la
production de FRO. En plus de cette séquence, il a été montré récemment que les
acides aminés situés juste en amont du domaine AD semblent aussi important pour
la régulation de l’activité de NOX2 [Maehara 2010]. De par ce rôle dans l’activation
de la NADPH oxydase, la p67 PHOX est considérée comme la sous-unité «activatrice»
du complexe NOX2. Par la technique du système double hybride et des essais
d’interaction in vitro, il a été démontré que le domaine PB1 (qui est un module
24