Remerciements - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

Résultats
II. Etude de la mort cellulaire par apoptose.
A. Principe
Pour connaître le nombre de mélanoblastes apoptotiques, la présence de la
caspase-3-clivée est détectée sur des coupes d’embryons ayant un fond génétique
Dct::LacZ à différents stades embryologiques.
Grâce à une double immunofluorescence, la détection de la β-galactosidase permet
d’identifier les cellules du lignage mélanocytaire, celui de la caspase-3 clivée permet
d’identifier les cellules en apoptose. La colocalisation des deux marquages indique
alors un mélanoblaste en apoptose (Fig. 3A).
Les comptes de mélanoblastes sont effectués à la fois dans le derme et dans
l’épiderme. Si la limite de l’épiderme est relativement aisée à caractériser, la limite
de profondeur du derme est difficile à estimer très précisément (Fig. 3B). Les
comptes de mélanoblastes ont été effectués à partir de 20 à 108 sections et sur un à
quatre embryons.
Figure 14. Mise en évidence des mélanoblastes en apoptose.
Cette figure représente différentes photographies d’une même coupe embryonnaire au stade de
développement E13.5. On peut observer une cellule possédant le double marquage de la β-
galactosidase et de la caspase-3 clivée. B. Limites du derme et de l’épiderme. Ep : Epiderme, De :
Derme.
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