Remerciements - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

Résultats
marqueurs
Dans l’épiderme, il est intéressant de noter qu’aucune colocalisation des
des mélanoblastes et de l’apoptose n’a été observée à aucun stade
embryonnaire et pour aucune des lignées de souris. Il semble donc que les
mélanoblastes ne meurent pas par apoptose dans ce compartiment durant les phases
du développement observées.
Dans le derme, on constate qu’au stade E14,5, aucune des lignées de souris ne
présente de mélanoblastes apoptotiques. Pour les stades E12,5 et E13,5, les
pourcentages de mélanoblastes en apoptose chez le mutant gain de fonction et chez
les souris sauvages sont comparables (les différences observées ne sont pas
significatives selon le test du p exact de Fisher). Pour le mutant perte de fonction, les
différences observées aux stades E12,5 et E13,5 sont plus importantes que pour le
mutant gain de fonction, cependant, les variations observées ne sont pas
significatives pour une valeur de p inférieure à 0,05.
Le rôle de l’apoptose dans l’apparition des phénotypes de mutants semble
donc être mineur voire nul.
III. Etude de la prolifération.
A. Principe
Pour connaître le nombre de mélanoblastes prolifératifs, nous avons effectué
une double immunofluorescence sur des coupes d’embryons ayant un fond génétique
Dct::LacZ à différents stades embryologiques avec deux anticorps primaires dirigés
contre la β-galactosidase et contre le BrdU.
Les souris mères sont injectées en deux temps avec du BrdU (100µg par gramme de
masse corporelle) deux heures avant le sacrifice pour récupérer les embryons.
Les cellules doublement marquées sont donc les mélanoblastes prolifératifs, c’est-àdire
qui ont effectué au moins une partie de la phase S du cycle cellulaire au cours
des deux heures (Fig.4).
Les comptes de mélanoblastes ont été effectués à partir de 20 à 107 sections et sur un
à quatre embryons.
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