P10607119-8 A2 - Questel

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várias fontes virais, incluindo o vírus do polioma, vírus BK, citomegalovírus
(CMV), adenovírus, vírus símio 40 (SV40), vírus do sarcoma -de Moloney,
vírus do papiloma bovino e vírus do sarcoma de Rous (deVilleirs et al supra,
Rosenthal et al. (1983) Science 222: 749-755, Hearing et al. (1983) Cell 33:
5 695-703, Weeks et al. (1983) Mol. Cell. Biol. 3: 1222-1234, Levinson et al.
(1982) Nature 295: 568-572, e Luciw et al. (1983) Cell 33: 705-716).
Vários sistemas de expressão para a imunização com ácido
nucleico e terapia de gene fazem uso do promotor inicial imediato do hCMV.
Ver por exemplo, as Patentes US 5168062 e 5385839 concedidas a
10 Stinski, e Relatório Descritivo de Patente EP 0323997 B 1. Os vetores de
expressão usando o promotor inicial imediato do hCMV incluem por
exemplo, pWRG7128 (Roy et al, Vaccine 19, 764-778, 2001), e pBC12/CMV
e pJW4303 que são mencionados na WO 95/20660. Chapman et al (1991)
supra relatam níveis reduzidos de expressão do promotor inicial imediato do
15 hCMV na ausência de hCMV Intron A.
Sumário da invenção
Uma construção de ácido nucleico foi desenvolvido usando
seqüências de promotor/expressão viral manipulados que fornece expressão
realçada de seqüências codificadoras heterólogas em células hospedeiras. A
20 construção é adequada para a expressão eficiente de genes e em particular
genes que codificam antígeno, e portanto podem ser usados na imunização
com ácido nucleico. A construção também pode ser usada para expressar
polipeptídeos adjuvantes. A construção pode ser fornecida em partículas
carreadoras, para o uso na imunização mediada por partícula com ácido
25 nucleico. Em uma forma de realização especialmente preferida da invenção a
construção codifica um antígeno da influenza, fragmento imunogênico deste
ou uma variante imunogênica de cada um. Em uma outra forma de realização
especialmente preferida a construção codifica um polipeptídeo adjuvante.
Conseqüentemente, presente invenção fornece uma