P10607119-8 A2 - Questel

mencionadas.
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Em casos onde a construção tem promotores quiméricos
múltiplos cada um pode compreender, ou ser operavelmente ligado a,
qualquer uma das seqüências aqui mencionadas. Em um exemplo
5 particularmente preferido, o intron heterólogo de um ou mais dos promotores
pode ser a seqüência de intron A do gene da insulina de rato. Um ou mais dos
promotores quiméricos também podem preferivelmente compreender a UTR
5' de HBVpre-S2. Um ou mais dos promotores podem compreender a
seqüência de poli adenilação do gene da beta globina de coelho.
10 Em um caso preferido, a construção de ácido nucleico da
invenção pode compreender duas seqüência promotoras quiméricas, com cada
seqüência promotora sendo operavelmente ligada a um sítio de clonagem que
tenha uma seqüência codificadora inserida nele, onde cada promotor
quimérico compreende:
15 (a) uma seqüência promotora inicial imediata de hCMV;
imediato maior de hCMV; e
(b) exon 1 e pelo menos uma parte do exon 2 do gene inicial
(c) um intron heterólogo fornecido no lugar da região de intron
A do gene inicial imediato maior de hCMV.
20 Com a seqüência codificadora operavelmente ligada a um
promotor quimérico que codifique uma subunidade LTA e a seqüência
codificadora ligada ao outro que codifica uma subunidade LTB. A construção
portanto pode expressar ambas as subunidades. Preferivelmente:
25 intron A do gene da insulina de rato;
- o intron heterólogo de cada promotor é a seqüência de
- a seqüência que codifica cada subunidade LT é
operavelmente ligada à UTR 5' de HBV pre-S2; e/ou
- uma seqüência codificadora de LT é operavelmente ligada
à seqüência de poliadenilação do gene da beta globina de coelho.