Apostila de bromatologia - Ciencialivre.pro.br

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8- Adicionar 3 gotas de solução de azul de metileno a 1% a esta solução a quente<br />(ficara novamente azulada) e continue a titulação até obter a coloração vermelho<br />tijolo.<br />9- Anotar o volume gasto na titulação para efetuar os cálculos<br />* vamos repetir o procedimento para confirmar o volume gasto<br />10- Completar novamente a bureta com a solução da amostra obtida no item 6<br />11- Colocar em erlenmeyer seco de 250 ml, 5ml de cada uma das soluções de<br />Fehling ( A e B) (obs: sempre colocar a solução B primeiro) e adicionar ± 40<br />ml de água destilada, adicionar a solução que esta na bureta colocando 1ml a<br />menos do que o gasto na primeira titulação (ex. se você gastou 10ml - coloque<br />9ml), e aquecer a ebulição, colocar 3 gotas de azul de metileno, e continuar a<br />titulação até a viragem da cor para vermelho tijolo<br />12- Anotar o volume gasto ( deve ser bem próximo ao obtido na 1 a titulação) para<br />fazer os cálculos.<br />Cálculo :<br />açúcar invertido após a hidrólise: 1000 T<br />tomada de ensaio<br />% de sacarose: (açúcar invertido depois da hidrólise- açúcar redutor antes da<br />hidrólise) X 0,95<br />4 - GLICIDES REDUTORES PELO MÉTODO DE SOMOGYI-NELSON<br />Método instumental : Espectrofotométrico<br />Princípio do método:<br />A glicose desproteinizada da amostra reduz sal de cobre, em meio alcalino<br />e a quente. A forma reduzida do sal de cobre atua sobre o reativo arseno<br />molibdico determinando o aparecimento da cor azul, cuja intensidade é<br />proporcional ao teor de glicose da amostra. Sob a ação do calor e do álcali, os<br />açúcres redutores se decompõem parcialmente em fragmentos oxidáveis pelo<br />13
hidróxido cúprico existente no reativo de Somogyi - Nelson, resultando em ácido<br />oxálico, malônico, etc. Nesta reação o hidróxido cúprico (azul) se reduz à hidróxido<br />cuproso (amarelo).<br />Continuando o aquecimento, o hidróxido cuproso perde uma molécula de<br />água, transformando em óxido cuproso (vermelho).<br />O óxido cuproso assim formado, vai reduzir o reativo arsenomolíbdico<br />dando o óxido de molibdênio (MO3O8) de coloração azul, cuja intensidade é<br />proporcional a quantidade de glicose existente na amostra.<br />Extração da amostra:<br />- Pesar 1g de amostra (ou pipetar 5 ml de suco) em um Becker de 50 ml<br />- Adicionar 5 ml de NaOH - 0,5N e agitar<br />- Lavar as paredes do Becker com água destilada<br />- Neutralizar com ácido acético glacial (± 0,1ml)<br />- Transferir o extrato para um balão de 100ml, lavando bem o Becker,<br />completar o volume.<br />- Neste extrato serão feitos os açúcares redutores(1 a SOLUÇÃO)<br />Hidrólise ácida da sacarose<br />- Do extrato obtido acima pipetar 20ml e transferir para um balão de 100ml<br />- Adicionar 0,5ml de HCL concentrado<br />- Aquecer em banho Maria fervente por 15 min.<br />- Esfriar em banho de gelo<br />- Neutralizar com sol. saturada de carbonato de sódio (±1,5ml)<br />- Completar o volume do balão para 100ml.<br />- Usar esta sol. para desproteinização (2 a SOLUÇÃO)<br />Desproteinização da amostra<br />-Colocar respectivamente em dois tubos de ensaio: 3ml da 1 a solução (tubo 1)<br />14
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