Autores: Geraldo Picheth1; Mauren Isfer Anghebem1,2; Guilherme Fadel Picheth3; Fabiane Gomes de Moraes Rego1 ARTIGO 01 1. Universidade Federal do Paraná. Departamento de Análises Clínicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - UFPR 2. Pontifícia Universidade Católica do Paraná. Escola de Ciências da Vida. 3. Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, Parasitologia e Patologia da Universidade Federal do Paraná. Quantificando enzimas de uso diagnóstico: revendo os conceitos e cálculos para a medida da atividade Resumo A medida das enzimas no laboratório clínico, enzimologia clínica, tem desenvolvimento contínuo a mais de um século. Notadamente, a partir dos anos 1950, a padronização da enzimologia se consolidou. Neste artigo, propomos revisar os principais conceitos e cálculos envolvidos na enzimologia em abordagem didática. As principais fases de uma reação catalisada por enzima, condições de ensaio, uso da absortividade molar e cálculos que convertem velocidade de reação em unidades de atividade enzimática, são discutidos. Palavras-Chave: Enzimologia, Absortividade Molar, Cálculo Atividade, Condição de Ensaio. Abstract The measurement of enzymes in the clinical laboratory, clinical enzymology, has been in continuous development for over a century. Notably, from the 1950s, the standardization of enzymology was consolidated. In this article, we propose to review the main concepts and calculations involved in enzymology in a didactic approach. The main phases of an enzyme-catalyzed reaction, test conditions, use of molar absorptivity and calculations that convert reaction rate into units of enzymatic activity are discussed. Keywords: Clinical Enzymology, Molar Absorptivity, Activity Calculation, Assay Condition. Introdução As enzimas, catalisadores proteicos, são elementos fundamentais para o processo metabólico (1). Em complemento com a ação enzimática de aumentar a velocidade de reação, as enzimas, através de sua modulação participam da regulação das vias metabólicas, sendo, portanto, fundamentais à homeostasia celular (2). As enzimas catalisam as reações químicas sob condições fisiológicas, 37°C e pH neutro, acelerando a velocidade da reação pela diminuição da energia de ativação necessária, sem alterar o equilíbrio da reação (3). Enzimas de uso diagnóstico, compõem um grupo seleto. A quantificação destas proteínas em um líquido biológico, fornecem informações relevantes sobre processos patológicos (4). Quantificar enzimas, usualmente presentes em concentrações muito baixas em líquidos biológicos, é um desafio analítico. Como “capturar” a enzima do “mar proteico” em que se encontra e medir sua concentração com especificidade, são os elementos centrais na medição de enzimas (5). Os conceitos, cuidados e cálculos envolvidos na enzimologia clínica são conhecidos de longa data. O laboratório clínico moderno apresenta extensa utilização de reagentes comerciais e de sistemas automatizados. Estes sistemas fornecem reagentes e indicações dos cálculos para a obtenção dos resultados enzimáticos. Na percepção dos autores, estes elementos associados à rotina de alto volume, favorecem que os profissionais do laboratório reduzam a atenção em fundamentos da enzimologia. Este artigo, busca recordar conceitos relevantes em enzimologia, enfatizando elementos de uso rotineiro e aplicação prática. 0 16 <strong>Revista</strong> NewsLab | Jun/Jul 2020
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