Aus dem Institut für Pathologie der Tierärztlichen Hochschule

Anhang 111
9.5 Lösungen für die in situ-Hybridisierung
Aqua bidest. DEPC (Diethylpyrokarbonat):
1 ml DEPC-Reinsubstanz
ad 1000 ml Aqua bidest.
autoklavieren
TRIS HCl (Trishydroxymethylammoniumethan):
MW 121,14, 1 M, pH 8,0
12,11 g/100ml Aqua bidest.
pH 8,0 mit konzentrierter HCL einstellen
CaCl2 (CaCl2 x H2O):
MW 147,02
für Proteinase K: 0,1 M = 1,47 g/100 ml Aqua bidest.
MgCl2 (MgCl2 x H2O):
MW 203,30
für PBS/5 mM MgCl2: 1 M = 20,33 g/100 ml Aqua bidest.
NaCl:
MW 58,44
für Hybridisierungssalze: 5 M = 29,22 g/100 ml Aqua bidest.
2 N (= 2 M) HCl:
für 0,2 N HCl: 50 ml 2 N HCl
ad 500 ml Aqua bidest.
5 N (= 5 M) NaOH:
MW 40,0
für EDTA-Na2-Lösung: 20 g NaOH-Plätzchen/100 ml Aqua bidest.
EDTA:
MW 372,3
Für 0,5 M EDTA, pH 8,0: 18,6 g di-Natrium-EDTA-di-Hydrat (= 14,6 g EDTA)
60 ml Aqua bidest. DEPC
pH mit 5 M NaOH (ca. 10 ml) auf 8,0 einstellen
ad 100 ml Aqua bidest. DPEC auffüllen und autoklavieren