Aus dem Institut für Pathologie der Tierärztlichen Hochschule

20 Literaturübersicht
2.3.8 Diagnostik zum Erregernachweis
Auf Grund der Schwierigkeiten der Therapie und der Prophylaxe gegen Infektionen
durch M. bovis kommt der bestandsumfassenden Diagnostik eine besondere
Bedeutung zu. Die Anzüchtung der anspruchsvollen Keime erweist sich oft als
langwierig und schwierig und ist somit nicht das Mittel der Wahl für ein zügiges
Ergebnis. In den frühen 90er Jahren wurden Enzym-gekoppelte, immunologischadsorbierende
Nachweisverfahren (engl. enzyme-linked immunosorbent assay,
ELISA) entwickelt, die gerade bei der Diagnostik von Milchproben sehr erfolgreich
sind (HELLER et al. 1993). Zum Nachweis von M. bovis-Antigen ist auf dem Markt
ein kommerzielles Kit erhältlich, welches von BALL und FINLEY (1998) entwickelt
wurde (Bio X, Luxemburg). In den 90ern kam zunehmend die Polymerase-
Kettenreaktion (engl. polymerase chain reaction, PCR) zum Einsatz (GHADERSOHI
et al. 1997). HOTZEL et al. (1999) beschreiben sogar ein kombiniertes Verfahren, bei
dem durch monoklonale Antikörper eine Aufkonzentrierung von M. bovis für eine
PCR erreicht werden konnte. Bei der Diagnostik der respiratorischen Mykoplasmose
ist zu berücksichtigen, dass sich ein Nasentupfer zwar als die bequemere Art der
Probensammlung erweist, allerdings eine deutlich geringere Sensitivität aufweist wie
die zurückgewonnene Flüssigkeit einer bronchioalveoläre Lavage (bronchioalveoläre
Lavage-Flüssigkeit, BALF) (THOMAS et al. 2002).
2.4 In situ-Hybridisierung
Die Methode der in situ-Hybridisierung (ISH) hat sich als ein wertvolles Instrument
zur Lokalisierung von Erregernukleinsäuren im infizierten Wirtsgewebe erwiesen
(LEITCH et al. 1994).
2.4.1 Methode
Bei der ISH kann man genomische DNA im histologischen Schnitt nachweisen,
indem man die Fähigkeit von Nukleotidsträngen nutzt, sich komplementär
aneinander zu legen. Die Methode wurde 1969 von PARDUE und GALL (1969)
sowie JOHN et al. (1969) unabhängig voneinander entwickelt. Am Anfang war es
lediglich möglich, die Sonden mittels Einbau radioaktiver Moleküle in Nukleotide