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$Using Electron Diffraction to Solve the Crystal ... - Staff.uni-mainz.de$

Konfokale Einzelmolekülmikroskopie Leistungsmeter in dem Strahlungsgang gemessen wird, lässt sich daraus die Anregungsintensität I (Energie pro Zeit und Fläche) mittels der Beziehung I = ( HWB la P 2 ateral 1. 177) ) ⋅ π (7) berechnen. Mit einem typische Wert von z.B. P = 2μ W , direkt vor dem Objektiv gemessen, ergibt sich (Annahme: NA = 1.4 , λ = 600nm ) eine Anregungsintensität von I = 1.7 ⋅10 7 2 W m − ! 3.1.2 Vergrößerung Ein typischer Strahlengang eines modernen Mikroskops wird in der folgenden Abbildung gezeigt, schematisch dargestellt bestehend aus zwei Linsen (tatsächlich bestehen schon Mikroskopobjektive aus mehreren Linsen). Das Objekt befindet sich in der Brennebene des Mikroskopobjektives mit der Brennweite f 1 , so dass das Bild des Objekts im Unendlichen liegt. Zwischen dem Mikroskopobjektiv und der Tubuslinse liegt der Infinity-Bereich, in dem die Strahlen parallel zur Verbindungsachse der beiden Linsen sich ausbreiten. Dies hat den ganz entscheidenden Vorteil, dass der Abstand zwischen diesen beiden Linsen verändert werden kann, ohne dass es sich auf die Abbildungsschärfe oder die Vergrößerung auswirkt. Abbildung 6 : Schematischer Aufbau eines optischen Mikroskops Johannes Gutenberg - Universität Institut für Physikalische Chemie Seite 12 Grundmodul Physikalische Chemie
Konfokale Einzelmolekülmikroskopie Werden in den Infinity-Bereich weitere optische Elemente wie Filter, Polarisatoren oder Strahlteile eingefügt, so wird die Abbildungsqualität dadurch weit weniger beeinträchtigt, als wenn die Strahlenbündel in diesem Bereich konvergent (nicht parallel) wären. Die Tubuslinse mit der Brennweitee f 2 erzeugt ein reales Zwischenbild in der Brennebene der Tubuslinse. Die Vergrößerung dieses Systems ist durch das Verhältnis der beiden Brennweitenn f 2 /f 1 gegeben. Die auf Mikroskopobjektiven aufgedruckte Vergrößerungg macht also nur in Kombinatio n mit einer Tubuslinse Sinn. Als möglicher Detektor kann z.B. der CCD-Chip erhält dann ein scharfes Bild, wenn sich das einer Videokamera genau im Abstand f 2 positioniert werden. Mannn Objekt im Abstand f 1 vom Mikroskopobjektiv befindet. 3.1.3 Fluoreszenzmikroskopie Die Fluoreszenzmikroskopie biete gegenüber reinen Transmissions- und Reflektionsmethoden den Vorteil, das Anregungslicht, mit dem die Probe beleuchtet wird, mittels optischen Filtern sehr effektiv vom Fluoreszenzlicht abzutrennen. Ein sehr einfacher Aufbau dafür kann mit einem farbteilenden (dichroitischen) Spiegel realisiert werden. Abbildung 7 : schematischer Strahlengang eines Fluoreszenzmikroskops mit Weitfeldbeleuchtung Johannes Gutenberg - Universität Institut für Physikalische Chemie Seite 13 Grundmodul Physikalische Chemie
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