Skript - Staff.uni-mainz.de
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Konfokale Einzelmolekülmikroskopie<br />
O<br />
O<br />
I / [a.u.]<br />
N<br />
O<br />
N<br />
O<br />
0<br />
650<br />
700<br />
λ / nm<br />
750<br />
800<br />
Abbildung 1 : Emissionspektren von<br />
einzelnenn Terrylendiimid Molekülen (angeregt<br />
@647nm), eingebettet in einen PMMA-Film.<br />
Je nach lokaler Umgebungg unter-<br />
schei<strong>de</strong>n sich die<br />
Spektren <strong>de</strong>r einzelnen Moleküle.<br />
1.2 Zeitabhängige Fluoreszenz<br />
Trotz zeitlich konstanter Anregung kann die Intensität <strong>de</strong>s emittierten Lichts sehr<br />
stark schwanken. Hierfür kann es sehr unterschiedliche<br />
Grün<strong>de</strong> geben. Häufig führt<br />
ein Übergang eines Farbstoffs in einen Triplettzustand zu einem kurzzeitigen<br />
Verschwin<strong>de</strong>n <strong>de</strong>r Emission, die nach <strong>de</strong>m Übergang<br />
in <strong>de</strong>n Grundzustand aber<br />
wie<strong>de</strong>r sichtbar wird. An<strong>de</strong>re Möglichkeiten sind<br />
dynamische Vorgänge wie Rotation<br />
o<strong>de</strong>r Translation<br />
<strong>de</strong>r beobachteten Farbstoffmoleküle, die auch zur Fluktuation <strong>de</strong>r<br />
<strong>de</strong>tektierten Intensität führen können.<br />
Abbildung 2 : Beispiel einer Zeitspur: zeitabhängige Fluoreszenz eines Moleküls<br />
In einem Ensemble-Experiment wird eine mittlere Fluoreszenz<br />
gemessen, d.h.<br />
Intensitätsfluktuationen einzelner Moleküle sind dort nicht sichtbar.<br />
Johannes Gutenberg - Universität<br />
Grundmodul<br />
Seite 6<br />
Institut für Physikalische Chemie<br />
Physikalische Chemie
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