pep-2 - Lehrstuhl für Ernährungsphysiologie - TUM

Proteinase K aus Triitirachium album Sigma-Aldrich (Fluka), Steinheim
Random Primers Fermentas, St. Leon-Rot
Ribonuclease Inhibitor Fermentas, St. Leon-Rot
Tris Roth, Karlsruhe
TRIZOL Invitrogen, Karlsruhe
Tween 20 Roth, Karlsruhe
2.1.2 Zusammensetzung der Medien, Medienzusätze,
Versuchspuffer und Arbeitslösungen
Cholesterin für NGM Agar:
0,5 g Cholesterin werden in 100 ml absolutem Ethanol gelöst.
Die Lösung wird bei –20°C gelagert.
Nystatin-Lösung für NGM-Agar:
Zunächst werden 4 g Nystatin-Pulver in einer 500 ml Schottflasche abgewogen. Dem
Pulver werden unter Rühren abwechselnd kleine Volumina der Lösungen A und B
hinzugegeben bis ein Endvolumen von 400 ml erreicht ist. Bei Lösung A handelt es sich
um 115,62 g Ammoniumacetat, welches nach und nach in dH2O bis zu einem Endvolumen
von 200 ml gelöst wird. Lösung B bezeichnet 200 ml unvergällten 96%iges Ethanol. Das
Nystatin wird vollständig durch Erwärmen auf 55°C gelöst. Die Lösung wird sterilfiltriert
und kann bei -20°C gelagert werden.
1 M Kaliumphosphatpuffer für NGM Agar:
108,53 g KH2PO4
35,28 g K2HPO4
werden in 1 l Millipore H2O gelöst, autoklaviert und mit KOH wird ein pH von 6,0
eingestellt.
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