pep-2 - Lehrstuhl für Ernährungsphysiologie - TUM

2x Worm Lysis Buffer (2x WLB):
100 µl 1 M KCl
100 µl 1 M Tris pH 8,0
100 µl 50 mM MgCl2
15 µl Nonidet P40
15 µl Tween 20
1 ml 0,1% Gelatine
10x Taq-Puffer:
500 mM KCl
100 mM Tris HCl pH 8,3
0,25% Tween 20
0,25% Nonidet P40
0,25 mg/ml BSA
20 mM MgCl2
sterilfiltrieren.
50x TAE:
242 g Tris
57,1 ml Eisessig
100 ml 0,5 M EDTA (pH 8,0)
werden gelöst und autoklaviert.
Arbeitslösung der Primer für PCR-Amplifikationen zur Identifizierung des
Mutanten Allels pep-2(lg601):
Eine Primer-Konzentration von 100 pmol/µl wird für die Standard-PCR eingesetzt, dazu
wird zum Lyophilisat das im Beipackzettel von MWG angegebene Volumen an Aqua
bidest. hinzupipettiert und 5 min bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wird die
Lösung gevortext und zentrifugiert.
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