2. Allgemeiner Teil - Online-Publikationen

Allgemeiner Teil
Entwicklungsschritte abnehmender Polarität resultieren, wobei der Entwicklungsverlauf nur
in eine Richtung erfolgt und bei jedem Schritt um 1-5 mm zunimmt.
Der zurzeit einzige Hersteller für AMD-Geräte ist die Firma CAMAG (Muttenz, Schweiz).
Das AMD-2-Gerät, das im Rahmen dieser Arbeit verwendet wurde, ist in Abbildung 8
dargestellt. Es besteht im Wesentlichern aus zwei Einheiten. Mit Hilfe einer
computergesteuerten Kontrolleinheit werden die Versuchsparameter eingespeist, der
Entwicklungsverlauf verfolgt und die resultierenden Daten ausgewertet. Die
Entwicklungseinheit enthält eine Kammer mit Einlass- und Auslassverbindungen für die
mobile Phase und das Konditionierungsgas, Flaschen für Lösungsmittel und
Lösungsmittelabfälle, einen Gradientenmixer, Spritzen zur Dosierung der benötigten
Lösungsmittelvolumina sowie einen Lichtschrankensensor zur Messung und Kontrolle der
fortschreitenden Laufstrecken.
Die praktische Durchführung des vollautomatischen Entwicklungsprozesses wird mit der
Evakuierung der Entwicklungskammer gestartet. Anschließend wird die Platte konditioniert
(siehe unten). Die Entwicklungskammer wird sodann mit einer mobilen Phase befüllt und
einige Millimeter entwickelt. Nach Beendigung eines Entwicklungsschrittes wird die
mobile Phase abgesaugt und die Platte für eine zuvor bestimmte Zeit im Vakuum
getrocknet. Diese Vorgänge werden solange wiederholt, bis die gewünschte Anzahl an
Entwicklungsschritten erreicht ist.
Die mobile Phase eines AMD-Gradienten beinhaltet typischerweise mindestens 3
Komponenten, die nach ihrer Funktion als Basisfließmittel (Dichlormethan,
Diisopropylether oder tert-Butylmethylether), Verstärker (Methanol, Acetonitril), und
Abschwächer (Hexan, Octan) eingestuft werden. Während das Basisfließmittel die
Selektivität des Gradienten und somit auch die Trennungsauflösung weitgehend bestimmt,
dienen der Verstärker und der Abschwächer zur Feinregulierung durch Polaritätsänderung.
Die wiederholten Entwicklungen bei der AMD-HPTLC führen dazu, dass sowohl die
aufgetragenen Probenbanden als auch jede der getrennten Substanzbanden mehrfach
geschärft werden (15, 119). Dies verursacht einen starken Fokussierungseffekt, der zu gut
aufgelösten (Peakkapazität bis zu 50 Peaks in 80mm) und präzise zu detektierenden und zu
quantifizierenden Banden führt. Auch die Konditionierung spielt bei der Verbesserung der
Trennleistung eine nicht zu vernachlässigende Rolle. Dabei wird ein Luftstrom durch eine
Lösung geleitet, mit ihr gesättigt und sodann in die Kammer geleitet, wo er in Kontakt mit
der Platte gebracht wird. Dadurch kann der pH-Wert, die Aktivität und die Selektivität der
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