2. Allgemeiner Teil - Online-Publikationen

Allgemeiner Teil
einheitliche Korngrößenverteilung voraus (43). Auf Grund der Tatsache, dass in der
Dünnschichtchromatographie die Voraussetzungen für die Kubelka-Munk-Funktion jedoch
nicht oder nur teilweise erfüllt sind, werden bei Kalibrierkurven häufig nichtlineare
Funktionen (z.B. Sättigungsfunktionen) benutzt.
Die Fluoreszenzmessung erfolgt nach dem selben Prinzip wie bei der Remission, mit dem
Unterschied, dass zwischen der Platte und dem Detektor ein Filter eingebaut ist, der nur das
emittierte Fluoreszenz-, nicht aber das Anregungslicht durchlässt. Dadurch wird eine hohe
Empfindlichkeit und für manche Stoffe eine hohe Spezifität erzielt.
Der prinzipielle Aufbau eines Densitometers besteht aus einer Lichtquelle, einem
Monochromator, einem Spiegel sowie einem Plattentisch (139). Als Lichtquelle dienen drei
Lampen: eine Deuterium-, eine Wolfram- und eine Quecksilberlampe. Während die
Deuterium- und die Wolframlampe als Kontinuumstrahler gelten und den UV/Vis-Bereich
abdecken, zeigt die Quecksilberlampe charakteristische Linien bei 254, 311 und 365 nm
und wird auf Grund der hohen Lichtintensität bei Fluoreszenzmessungen eingesetzt. Der
Monochromator dient dazu, die gewünschte Wellenlänge herauszufiltern. Der auf den
Spiegel gelangende Lichtstrahl wird in Form eines in seiner Höhe und Breite einstellbaren
Spaltes auf die Platte gelenkt, die auf einem in allen Richtungen beweglichen Tablett liegt.
Beim Scannen wird nicht der Lichtstrahl, sondern das Tablett bewegt, wobei die Bewegung
in die Entwicklungsrichtung erfolgt. Das von der Platte reflektierte Licht wird von einem
Photomultiplier erfasst, wobei eine computergesteuerte Kontrolleinheit die Registrierung
und die Integration der Daten übernimmt. Die detektierten Substanzbanden oder Flecken
werden in Form von Peaks gespeichert. Die Quantifizierung kann auf der Basis der
Peakflächen oder der Peakhöhen erfolgen.
2.2.2 Hochleistungsflüssigchromatographie [HPLC]
Unter dem Begriff HPLC versteht man die hochauflösende Flüssigchromatographie mit
einer hohen Trennleistung (bis ca. 15000 theoretische Böden). Dabei besteht die stationäre
Phase aus porösem homogen verteiltem Material, das meist in einer druckfesten Stahlsäule
untergebracht ist, durch die eine mobile Phase mit hohem und konstantem Druck gepumpt
wird (78). Als Packungsmaterialien der stationären Phase dienen hauptsächlich Kieselgel
und seine Derivatisierungsprodukte, wobei gleichmäßige sphärische Partikel
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