2. Allgemeiner Teil - Online-Publikationen

2.2.3.4 LC/MS-Kopplung
Allgemeiner Teil
Viele biologische Proben wie z.B. die Lipidextrakte des SC zeichnen sich dadurch aus, dass
sie komplex zusammengesetzte Mischungen aus unterschiedlichen Stoffen oder
Stoffklassen darstellen. Daraus resultiert, dass eine direkte massenspektrometrische
Analyse von solchen Proben keine aufschlussreichen Resultate liefern kann. Eine vorherige
Trennung oder Fraktionierung ist somit in den meisten Fällen erforderlich (88). Wird eine
flüssigchromatographische Trenntechnik (z.B. HPLC) mit einem Massenspektrometer
kombiniert, das hier als Detektor fungiert, dann spricht man von einer LC/MS-Kopplung
(167).
Auf dem Entwicklungsweg der LC/MS zu einem Standardverfahren sowohl in der
Forschung als auch in der Routineanalytik mussten mehrere technische Hindernisse
bewältigt werden. Zum einen weisen die Massenspektrometer ein Hochvakuumsystem auf
und zum anderen sind relativ hohe Flussraten zwischen 0,1 und 1 ml/min bei
flüssigchromatographischen Trennungen und hauptsächlich bei der HPLC nicht unüblich.
Eine direkte Kopplung würde naturgemäß das Hochvakuum beeinträchtigen. Zur
Bewältigung dieser Problematik wurden viele Ansätze, von denen beispielhaft das Moving-
Belt-, das Continuous Flow- und das Thermospray-Verfahren genannt seien,
vorgenommen. Sie waren allerdings aufwendig und nicht einfach zu handhaben. Erst nach
der Einführung der API-Technik (ESI und APCI) konnte der Durchbruch für die LC/MS als
ein weit verbreitetes analytisches Verfahren errungen werden. Dabei werden die
Lösungsmittelmoleküle durch unterstützende Stickstoffströme und/oder hohe Temperaturen
verdampft und die Analytmoleküle ionisiert. Die Intensität der erhaltenen Signale ist in
erster Linie von der Ionisierbarkeit des Analyten und von der Konzentration, weniger von
der Flussrate abhängig.
Ein sehr beachtlicher Vorteil der LC/MS ist die hohe zweidimensionale Spezifität, die sich
aus der Selektivität der chromatographischen Trennung und der Selektivität der
massenspektrometrischen Detektion ergibt. Auch chromatographisch nicht getrennte Peaks
können massenspektrometrisch unterschieden werden. Des Weiteren stellt die LC/MS-
Kopplung eine bedeutende Möglichkeit dar, solche Substanzen online zu detektieren, die
mit konventioneller UV-Detektion nicht erfasst werden können wie z.B. viele Lipide.
Neue Entwicklungen im Bereich der LC/MS verfolgen heutzutage das Ziel, die
Massenspektrometer so zu optimieren, dass diese gegenüber Matrices in biologischen
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