1 Einleitung - Universität zu Lübeck

2.3 Labormethoden
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Nach der venösen Entnahme wurden die Blutproben sofort bei 4000 Upm für 10 Minuten
zentrifugiert und in beschriftete Eppendorfhütchen abgehebert. Bis zur Analyse waren die
Proben in der Curschmannklinik bei –25°C, nach dem Transport in das Labor der
Johannes Gutenberg-Universität Mainz bei –80°C kontinuierlich tiefgefroren. Der
Transport erfolgte auf Trockeneis. Die Laboratoriumsanalyse der Proben bzgl. der
Routineparameter erfolgten im Institut für Klinische Chemie und Laboratoriumsmedizin
der Johannes Gutenberg-Universität Mainz (Direktor: Prof. Dr. med. K. Lackner). Die
verwendeten Methoden stellen Routineverfahren dar.
Im Einzelnen wurde die Konzentration des CRP im Plasma mittels partikelverstärkender
Immunturbidimetrie analysiert. Nach Agglutination des CRP mit monoklonalen Anti-CRP-
Antikörpern beschichteten Latexpartikeln lässt sich der Niederschlag turbidimetrisch bei
552 nm bestimmen (Firma Roche Diagnostics, Deutschland).
Die Bestimmung der Triglyzeride erfolgt mit Hilfe eines in vitro Diagnostikum zur
quantitativen Bestimmung der Triglyzeridkonzentration in humanen Plasma- und
Serumproben. Bei diesem Test handelt es sich um eine enzymatische, kalorimetrische
Methode (GPO/PAP). Die Triglyzeride werden zunächst mit Glycerinphosphatoxidase
(GPO) enzymatisch in Glycerin und freie Fettsäuren gespalten. Nach weiterer
Phosphorylierung und Oxidation des Glycerins wird dieses mit Hilfe von 4-
Aminophenazon (PAP) angefärbt. Die Extinktionszunahme ist direkt proportional zur
Triglyzeridkozentration in der Probe (Firma Roche Diagnostics, Deutschland).
Das in vitro Testverfahren für das Gesamt-Cholesterin beruhte auf einem enzymatischen
Farbtest. Im Serum und im Plasma müssen zunächst die Cholesterinester mit Hilfe von
Cholesterinesterase in freies Cholesterin umgewandelt und dieses mit Cholesterinoxidase
unter O2-Verbrauch in Cholestenon und Wasserstoffperoxid überführt werden, welches
einen roten Farbstoff mit Phenol und 4-Aminoantipyrin bildet und proportional zur
Cholesterinkonzentration gemessen wird (37). (Das LDL wurde mit Hilfe der
Friedewaldformel aus dem Gesamt-Cholesterin, den Triglyzeriden und dem HDL-
Cholesterin (HDL-C) berechnet.
LDL-C (mg/dl)= Cholesterin (mg/dl) - HDL-C (mg/dl) - (Triglyzeride (mg/dl): 5)
Es ist zu bemerken, dass bei Triglyzeridkonzentrationen > 400 mg/dl (> 4,5 mmol/l), die
postprandial vorliegen können, also insbesondere in unserer Studie, die Friedewaldformel