Die Embryonalentwicklung der Paradiesschnecke ... - TOBIAS-lib

Kapitel 5
Die Gesamtproteinmenge wurde nach Bradford (1976) ermittelt. Jeweils 40
µg Protein wurden auf ein Polyacrylamidgel gegeben und die Proteine elektrophoretisch
aufgetrennt sowie auf Nitrocellulosemembranen transferiert.
Im Anschluss wurden die Nitrocellulosemembranen mit dem ersten Antikörper
(monoklonaler Maus anti-human Hsp70 Antikörper (1 µl Antikörperlösung,
0,5 ml Pferdeserum, 4,5 ml TBS)) inkubiert, gespült und mit einem
zweiten, Peroxidase-konjugierten Antikörper inkubiert. Die Banden wurden
durch eine Peroxidasefärbereaktion sichtbar gemacht und densitometrisch
ausgewertet. Eine detaillierte Beschreibung der Stressproteinanalyse ist bei
Osterauer et al. (2010a) zu finden.
Ergebnisse
Abb. 1 zeigt die relativen Hsp70-Level der Kontroll-Individuen bei 26 ◦ C und
bei 29 ◦ C sowie der gegenüber Platin 2+ exponierten Embryonen bei ebenfalls
26 ◦ C und 29 ◦ C. Den höchsten Hsp70-Gehalt wiesen die Individuen mit
interner Schale, bei 26 ◦ C gegenüber Platin 2+ exponierten Embryonen auf.
Die Kontrollen bei 29 ◦ C zeigten den zweithöchsten Wert, gefolgt von den
Kontrollen bei 26 ◦ C. Den niedrigsten Hsp70-Gehalt wiesen die bei 29 ◦ C
gegenüber Platin 2+ exponierten Embryonen mit Teilschalen auf.
Diskussion
Bei 26 ◦ C führt eine Exposition gegenüber Platin 2+ bei Embryonen von Marisa
cornuarietis zu einer deutlichen und starken Fehlbildung. Diese Tiere
bilden keine äußere, sondern nur eine innere Schale (Osterauer et al., 2010b;
Marschner et al., 2012). Exponiert man die Embryonen jedoch bei einer leicht
erhöhten Temperatur, so wird die drastische Wirkung dieses Edelmetalls abgemildert
und die Schnecken bilden eine Teilschale, d.h. sie entwickeln sich
„normaler“ als bei niedrigeren Temperaturen unter Platin 2+ -Einfluss (Marschner
et al., 2013). Die Analyse der jeweiligen Stressproteinlevels ergab
jedoch, dass diese Embryonen nicht nur einen weitaus niedrigeren Hsp70-
131