liiiMIIIfl~UDliiiMIII~U - Biblioteca de la Universidad Complutense ...

Canitulo 3
nas localizadas fuera de la mitocondria (como por
ejemplo las citaqueratinas) que pudieran favorecer
la conformación menos activa (tensa) de la enzima.
En este contexto resulta interesante la sugerencia
de que una proteína de la membrana externa mitocondrial
(bcl-2) interacciona con la CPT-l en lo
que podria constituir también una forma de regulación
de la enzima (Paumen el aL, 1997b). La regulación
de esas interacciones podría depender de
la actividad de una serie de proteína quinasas que
controlan el grado de organización del citoesqaeleto.
iii) Localización subeelular de IaACC.
Se ha propuesto que la isoenzima de 280
KDa de la ACC podría tener una localización subcelular
próxima a la CPT-l, asociándose a la propia
membrana mitocondrial externa (Ha el aL, 1996).
En la memoria se sugiere que una fracción de la
ACC hepatocelular se encontraría asociada al citoesqueleto
(Capítulo 2.3.3). Así, la concentración
efectiva de malonil-CoA para inhibir a la CPT-l
podría ser mucho mayor cuando la ACO se encontrase
en las proximidades de la enzima. Los mismos
factores que están implicados en el control del
grado de polimerización del citoesqueleto podrían
controlar el porcentaje de ACC asociada al mismo,
y con ello la proximidad de ésta a la CPT-I.
2. Principales proteína quinasas implicadas en
el control a corto plazo de la CPT-I
Puesto que el control de esas tres vías de regulación
de la CPT-l depende en gran parte del grado
de fosforilación de las diferentes proteínas implicadas,
el control de la actividad de ciertas quinasas
es el que determina la actividad a corto plazo de la
CPT-l.
2 ¡ /CMPKIL
¡) Ca
La activación de esta quinasa que induce el ácido
okadaico conlíeva: 1) la fosforilación y ruptura de
los filamentos intermedios (CapItulo 2.2; Toivola
el aL, 1997) y 2) la fosforilación e inactivación de
la ACC (Haystead el aL, 1988). Ambos procesos
traen consigo una fuerte estimulación de la actividad
CPT-l. Sin embargo, la incubación con diferentes
compuestos que producen un incremento en
la concentración de Oa2~ intracelular no modifica
la actividad de la CPT-l, lo que -como ya se ha
discutido anteriormente (CapItulo 2.2)- podría ser
el reflejo de un diferente patrón de activación de la
Ca2~/CMPKll de hígado con respecto a la de otros
tejidos más estudiados como el cerebro. Por ello
nos planteamos si el papel fisiológico que desempeña
esta quinasa en la regulación de la CPT-I
podría depender no tanto de un aumento transitorio
de la concentración de Ca2 intracelular como de
Discusión General y Conclusiones
otros factores que hicieran que la Ca2~/CMPKll se
viera estimulada de una forma más prolongada.
Puesto que el ácido okadaico es un agente
promotor de tumores (Wera y Hemmings, 1995) y
en células de hepatoma tieñe lugar la sobreexpresión
de diferentes proteína’ quinasas (Yang el al.,
1996; Tanaka y Wands, 1996), el nivel de activación
de la Ca2~/CMPKll que induce el ácido okadaico
podría ser más parecido al que puede encontrarse
en el interior de las células transformadas
que al debido a una activación mediada por un
incremento de la concentración de Ca2~ intracelular.
Dado que una de las características de dichas
células transformadas es qúe se producen grandes
alteraciones en la morfología celular mediadas por
una desorganización del citoesqueleto, los estudios
llevados a cabo en células ‘de hepatoma (Capitulo
2.3.1) sonde gran interés, Estos datos indican que,
en células Fao y HepG2 el ‘ácido okadaico no modula
la actividad de CPT-I, que estaría aumentada
con respecto a la de hepatocitos. La posibilidad de
que esa falta de respuesta sea debida a una pérdida
(que podría ser constitutiva en esas células) de las
interacciones con el citoesqueleta aparece como
atractiva, puesto que estaria~ en consonancia con los
datos anteriormente expuestos.
Por otra parte, como ya se ha mencionado,
recientemente se ha establecido una relación entre
actividad CPT-I y apoptosis (Paumen el aL,
1997a), de tal manera que una inhibición de la
CPT-l aumentaría la disponibilidad de palmitoil-
CoApara la síntesis de cerámidas que actúan como
mediadores en dichos procesos de apoptosis
(Hanraun, 1996). Es interesante que: 1) las células
de hepatoma cuya actividad GPT-l es más alta que
la de los hepatocitos normales (Gapítulo 2.3.1), son
resistentes a la inducción de apoptosis por ácido
palmítico (Paumen el al, 1997a); 2) parte de los
efectos de las ceramidas están mediados por una
proteína fosfatasa activada’ por ceramida (CAPE’)
que es inhibible por ácido okadaico (Hanraun,
1996); 3) bcl-2, una proteína que desempeña un
papel importante en la regulación de la apoptosis
interacciona con la CPT-l en la membrana mitocondrial
externa (Paumen el aL, 1997b). Todos
estos datos considerados conjuntamente apuntan a
que la regulación de la actividad GPT-I podría ser
importante en el control de los procesos apoptóticos.
Era suma, la activación de la CPT-l observada
era células de hepatoma podría ser una forma de
favorecer que la célula no ~ntrase en apoptosis. En
ese sentido resulta muy atractivo considerar que la
desorganización del citoesqueleto (característica de
las células tumorales y que ‘ha sido descrita en este
trabajo como un mecanismo de regulación de la
GPT-l ) pudiera contribuir a dicho bloqueo de la
apoptosis (Esquema 2).