HerdChek* BSE-Scrapie Antigen BOVINE SPONGIFORM ... - Defra

I campioni di cervello di piccoli ruminanti devono essere analizzati in duplicato utilizzando
direttamente l’omogenato originale di tessuto cerebrale. NON trattare con calore gli
omogenati di piccoli ruminanti. Se il campione analizzato in duplicato presenta valori
ancora superiori o uguali al livello di cut off, allora il campione è da considerare positivo.
Il campione è considerato negativo quando entrambi i valori dei replicati sono inferiori al
valore limite del test.
Protocollo opzionale per il trattamento di calore per omogenati bovino
inizialmente reattivi:
(Il protocollo con il trattamento termico si applica solo su campioni bovini.)
Prelevare 230 ± 20 µl dell’omogenato di tessuto inizialmente reattivo ed erogarlo in
una provetta a fondo conico con tappo a vite da 1,5–2,0 ml. Collocare la provetta in
un’unità di riscaldamento a secco preriscaldato a 70 ±2°C. Riscaldare la provetta per
10 ±1 minuti e quindi inserire la provetta in un supporto aperto a 18–26°C per almeno
20 minuti, per consentire il raffreddamento del campione. Il test dell’omogenato deve
essere ripetuto entro due ore dal trattamento con calore, in duplicato, con il IDEXX
HerdChek BSE-Scrapie Antigen Test Kit.
Precauzioni
• Non esporre il substrato TMB a luce intensa o ad agenti ossidanti. Per versare il
substrato TMB usare esclusivamente strumenti di plastica puliti oppure monouso.
• Usare cautela per evitare di contaminare i componenti del kit. Non usare i componenti
oltre la data di scadenza e non interscambiare componenti appartenenti a lotti di kit
diversi.
• Alcuni componenti del kit contengono azoturo di sodio come conservante (vedere
la descrizione dei componenti del kit). Usare cautela per evitare di contaminare il
coniugato anti-PrP-HRPO con le soluzioni contenenti azoturo di sodio.
• Conservare tutti i reattivi a 2–8°C. Portare i reattivi a 18–26°C prima dell’uso e
conservarli alle corrette temperature dopo l’uso (vedere la sezione Conservazione dei
reagenti preparati).
• Usare vassoi separati per ciascun reattivo usato nell’analisi. Evitare la contaminazione
crociata del substrato TMB con la soluzione di coniugato diluita. Non versare
nuovamente nel flacone la soluzione TMB non utilizzata.
• Aggiungere i reagenti nelle piastre microtiter al massimo entro 5 minuti dal termine
delle operazioni di lavaggio.
Informazioni relative alla sicurezza
• Tutto il personale deve ricevere le informazioni necessarie sui rischi connessi alla BSE
e alla scrapie e deve conoscere le procedure di decontaminazione raccomandate. Le
procedure di biosicurezza devono essere scrupolosamente seguite come previsto dalle
norme nazionali sulla sicurezza.
• Il buffer di condizionamento contiene agenti caotropici; evitare il contatto con la pelle e
le membrane mucose.
• Il substrato TMB può irritare la pelle e gli occhi. Evitare il contatto diretto.
• Il diluente 1 della piastra contiene detergenti in concentrazioni elevate; evitare il
contatto diretto.
• Evitare l’uso di contenitori di vetro in laboratorio.
Appendice
Il campionamento e le procedure di test di laboratorio devono seguire il regolamento (CE)
n. 999/2001 Annex X, Capitolo C, che si riferisce, per la raccolta dei campioni, all’ultima
edizione del Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines of the International
Office of Epizootic Diseases (OIE), nel quale si legge che: “Il campione ideale per l’analisi
immunologica deve essere prelevato dall’obex, o quanto più vicino ad esso possibile, ma
non più distante di 1,5 cm dalla parte anteriore dell’obex.”
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