HerdChek* BSE-Scrapie Antigen BOVINE SPONGIFORM ... - Defra

Kit para Detecção do Antigénio da Encefalopatia
Espongiforme Bovina–Scrapie, EIA
Para uso exclusivamente veterinário.
Versão portuguesa
Descrição Geral
O Kit de Teste de antigénio IDEXX HerdChek* para a Encefalopatia Espongiforme Bovina
(EEB)-Scrapie é um imunoensaio enzimático de captura de antigénio (EIA/ELISA) para
detecção da presença de proteínas priónicas com conformação anormal (PrP Sc ) em tecidos
cerebrais post-mortem (preferencialmente do óbex) de bovinos e pequenos ruminantes
(ovinos e caprinos), afectados pela encefalopatia espongiforme bovina (EEB) ou Scrapie.
Para aplicação em pequenos ruminantes, o teste também detecta PrP Sc em nódulos linfáticos
ou tecidos esplénicos. O teste foi concebido para identificar rapidamente amostras que
contenham PrP Sc associados a doença com manipulação mínima da amostra, e pode
ser automatizado para aplicações de alto rendimento. Este kit é de uso exclusivamente
veterinário.
Para os Estados Membros Europeus: Teste para detecção in-vitro de PrP Sc relacionada com
a BSE e com a BSE-Scrapie.
O fabricante do teste rápido tem de ter implementado um sistema de garantia de qualidade,
de acordo com o Laboratório de Referência União Europeia (EURL), de forma a assegurar
que o desempenho do teste não é alterado. O fabricante tem de fornecer o protocolo
de teste ao EURL. As ferramentas de amostragem e as modificações ao teste rápido ou
ao protocolo de teste (incluindo a amostragem) apenas podem ser efetuadas mediante
notificação prévia ao EURL, e desde que o EURL considere que a modificação não reduza
a sensibilidade, especificidade ou confiabilidade do teste rápido. Essa conclusão deve
ser comunicada à Comissão e aos laboratórios nacionais de referência (Com Base no
Regulamento (EC) Nº 956/2010, Regulamento modificado (EC) No 999/2001).
Kit de teste para detecção do antigénio da
encefalopatia espongiforme bovina–scrapie, EIA
Descrição e Princípios
Este kit emprega um método exclusivo, propriedade da Microsens Biotechnologies (Londres,
Reino Unido; patente pendente), que permite a detecção de priões anormais. Um ligando
específico de PrP Sc é imobilizado na superfície da placa de captura de antigénio. As amostras
de teste são preparadas homogenizando os tecidos e diluindo a amostra com diluente para
placa de trabalho. Depois da adição da amostra à placa, a proteína com alteração da forma
tridimensional une-se, com grande afinidade, ao ligando imobilizado. As placas são lavadas
para remover materiais não ligados, incluindo o conformador normal da proteína PrP. A seguir
à incubação com solução tampão de condicionamento, o antigénio capturado é, então,
detectado, utilizando um anticorpo específico para PrP, que foi conjugado para peroxidase
(HRPO). A placa é lavada para remover o conjugado não ligado e é adicionado um substrato
de peroxidase. O desenvolvimento da cor está relacionado com as quantidades relativas de
PrP Sc capturada pelo ligando imobilizado na cavidade da placa de micro titulação.
A interpretação dos resultados é baseada na absorvância da amostra. Uma amostra cujo A 450 – A REF
seja inferior ao valor “cutoff” é considerada negativa pelo Kit de Teste de Antigénio de EEB-Scrapie
IDEXX HerdChek. As amostras cujo A 450 – A REF seja igual ou superior ao valor “cutoff”, são classificadas
como positivas para a PrP Sc . Um ensaio de confirmação, como de imunohistoquímica, é
necessário para todos os resultados positivos do teste.
Componentes do Kit
Conservar todos os componentes a 2–8°C.
Item
A Placas de captura de antigénio
460 testes
5 placas
N Controlo negativo—Não-reactivo á placa de 5 x 1 ml
captura de antigénio; conservado com azida de sódio
P Controlo positivo—Não infeccioso, reactivo á
placa de captura de antigénio; conservado com
azida de sódio
5 x 1 ml
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