HerdChek* BSE-Scrapie Antigen BOVINE SPONGIFORM ... - Defra

D1 Componente 1 de diluição para placas;
conservado com azida de sódio
20 ml
D2 Componente 2 de diluição para placas 5 x 200 µl
R Diluente de reconstituição
20 ml
CB Solução Tampão (buffer) de condicionamento; 60 ml
conservada com azida de sódio
CC Solução concentrada de conjugado; conservada 300 µl
com Bronidox L e metilisotiazolona
SRB-CC Solução concentrada de conjugado para 300 µl
cérebro de pequeno ruminante;
conservada com Bronidox L e metilisotiazolona
CD Diluente tampão de conjugado com
detergentes e estabilizadores de proteínas;
conservado com Kathon
60 ml
W1 Solução 1 de lavagem (concentrada 10x); 450 ml
conservada em azida de sódio
W2 Solução 2 de lavagem (concentrada 10x); 450 ml
conservada com gentamicina
T Substrato TMB (Tetrametilbenzideno)
60 ml
NOTA: veja a tabela no final do protocolo para descrição dos símbolos internacionais usados
nos rótulos dos kits.
Materiais e Equipamentos Necessários (Não Fornecido)
• Pipetas de precisão ou pipetas muitidispensadoras adequadas para conter de 25 a
200 µl. Os volumes de reagentes indicados no Procedimento de Teste requerem uma
precisão inferior ou igual a 5%.
• Provetas graduadas para soluções de lavagem
• Coberturas para placas em plástico rígido ou adesivas, e bandejas para manusear os
reagentes
• Instrumentos descartáveis de recolha e dissecção de amostras, ou dispositivo de
colheita de amostras
• Leitor de placas para 96 cavidades (equipado com filtros 450 nm e 620–650 nm) e
lavador
• Instrumento FastPrep* (FP120A, FP220A), Precess 48*, Precess 24* ou Precellys 24*
• Kit de acessórios-placas de diluição, tubos de disrupção de tecidos com grânulos,
pontas de pipeta de transferência de homogeneizado de comprimento alargado e
tampas de placas adesivas (disponível na IDEXX)
• Equipamento de proteção pessoal: luvas de segurança, batas, luvas descartáveis,
coberturas para sapatos, redes para cabelo, máscaras faciais
• Solução de paragem 0,5–1,0 N HCl ou 1,0 N H 2
SO 4
• Hipoclorito de sódio (lixívia comercial), 1N NaOH e 1N HCl, água desionizada
• Opcional—processador robótico de amostras—opcional, com precisão de pipetagem
de ≤2,5%, conforme medido por análise CV (Tecan, por exemplo)
• Opcional—agitador de placas de micro titulação—opcional (por ex., IKA MTS 2/4)
• Opcional—incubador de placas com capacidade para manter uma temperatura de
32–37°C e um fluxo de ar mínimo
• Opcional—bloco de aquecimento seco para tubos de microcentrífuga (tipo
“eppendorf”) de 1,5–2 ml (capaz de manter a temperatura de 70°C)
• Opcional—tubos cónicos de 1,5–2 ml sem borda e com tampa de rosca
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