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Carla Renata Merlo, Miriam Ribeiro Alves e Suzana Mali RESULTADOS E DISCUSSÃO A precisão do método, conceituada como repetibilidade, foi estimada como sendo a concordância entre os resultados, dentro de um curto período de tempo e com o mesmo analista e mesma instrumentação. A repetibilidade do método foi verificada por 9 determinações, contemplando o intervalo linear do método (dados não apresentados), com 3 concentrações: baixa, média e alta, e com 3 réplicas cada uma delas. Foi observado que para as amostras de medicamentos alopáticos, o coeficiente de variação máximo foi de 1,06%, estando de acordo com os valores permitidos pela legislação brasileira para validação (RDC 899 - 2003), que exige, no máximo, 5% de variação. Quando foram analisadas as amostras de medicamentos fitoterápicos, os coeficientes variaram de 4,8 a 8,1 %, ultrapassando os limites estabelecidos, dependendo da concentração da amostra. Provavelmente, a precisão com relação aos fitoterápicos, situou-se fora dos padrões devido à não uniformidade das amostras. A linearidade do método foi determinada pela análise de 5 concentrações diferentes do padrão de vitamina C (0,08; 0,09; 0,10; 0,11 e 0,12 g./mL.). As análises foram realizadas com duas repetições, e as duas curvas obtidas estão apresentadas na Figura 1 (a,b) Não houve diferença estatística entre os resultados das curvas. O coeficiente de correlação (r) foi igual a 1,0 nos dois casos, podendo-se observar que os modelos derivados da regressão linear se adequaram bem aos dados experimentais; portanto, a linearidade do método atendeu aos critérios mínimos aceitáveis pela legislação. 91 Figura 1 – Curvas de volume gasto da solução titulante versus concentração de vitamina C: (a) repetição 1 – modelo matemático (y=0,009x + 7.10 -16 ); e (a) repetição 2 – modelo matemático (y=0,009x - 1.10 -15 ). A linha deriva do modelo matemático linear e, os pontos, dos dados experimentais. R E V I S T A TERRA E CULTURA - Nº 44 - Ano 23 - Janeiro a Julho 2007
Validação de Metodologia Analítica para Determinação de Ácido Ascórbico... A exatidão de um método analítico consubstancia-se na proximidade dos resultados obtidos pelo método em estudo em relação ao valor verdadeiro. No presente trabalho, a exatidão foi determinada aplicando-se a metodologia analítica proposta para a análise de uma substância de pureza conhecida (padrão de vitamina C). A exatidão do método foi obtida a partir de 9 determinações contemplando o intervalo linear do procedimento, ou seja, 3 concentrações: baixa, média e alta, com 3 réplicas cada. Nas três diferentes concentrações, 0,10; 0,11 e 0,12 g./mL. de vitamina C, a exatidão foi de 100, 99 e 98%, respectivamente, valores que ficaram, também, dentro dos parâmetros estabelecidos pela legislação. A robustez de um método analítico é a medida de sua capacidade para resistir a pequenas e deliberadas variações dos parâmetros analíticos e indica o grau de confiança do método durante o uso normal. Ao longo do desenvolvimento da metodologia, houve variação da marca do reagente empregado para o preparo da solução padrão de iodo; esta modificação não gerou alterações significativas no resultado do doseamento, realizado, tanto nas amostras de medicamentos alopáticos quanto nas de fitoterápicos. CONCLUSÕES 92 O método analítico aplicado para a quantificação de vitamina C mostrou-se adequado aos limites estabelecidos pela legislação brasileira para validação, exceto para o parâmetro precisão, que para os medicamentos fitoterápicos apresentou-se além dos padrões, provavelmente devido à não uniformidade das amostras. REFERÊNCIAS ANVISA. Resolução 899 de 29 de maio de 2003. Disponível em, . Acessado em 20 de setembro de 2004. FARMACOPÉIA BRASILEIRA IV. 4.ed. São Paulo: Atheneu Editora, 1988. FONSECA, Said G. C., SILVA, Leila B. L. da, CASTRO, Rebeka F. et al. Validation of the Analytical Methodology for Evaluation of Lapachol. In: Solution by HPCL. Quím. Nova. v.27, n.1, jan./feb., p.157-159, 2004. PAIM, Ana Paula S.; KRONKA, Eloisa Ap. M.; REIS, Boaventura F. et al. Spectrophotometric Determination of Ascorbic Acid in Drugs Employing Binary Sampling in Flow System. Quím. Nova. v.21, n.1, jan./feb., p.47-50, 1998. R E V I S T A UNITED STATES PHARMACOPEIA - NATIONAL FORMULARY. USP 26 NF21. Rockville: United Sates Pharmacopeia Convention, Inc., 2003. TERRA E CULTURA - Nº 44 - Ano 23 - Jameiro a Julho 2007
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