UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO ... - UFRJ

MATERIAIS E MÉTODOS 33solução de fósforo a 20 µg/mL. O mesmo procedimento foi usado para determinação do teorde fosfatidilcolina nos lipossomas.Esquema do procedimento técnico usado para a dosagem de fósforo das matérias-primas edos lipossomas formados.BRANCO TESTE PADRÃOEtanol p.a.(B1, B2, B3) 1,0 mL - -Amostras (A1, A2, A3) - 1,0 mL -Padrão - - 50, 100, 150, 200 µLH 2 SO 4 0,4 mL 0,4 mL 0,4 mLMisturar e colocar em placa de aquecimento de tubos na temperatura entre 185 – 200ºC. Deixar sob digestão por 30 minutos. Resfriar os tubos de adicionar:BRANCO TESTE PADRÃOH 2 O 2 10 % 0,2 mL 0,2 mL 0,2 mLMisturar e colocar em placa de aquecimento entre 185 – 195 ºC. Deixar por 30minutos. Após este tempo verificar se a solução no fundo do tubo apresenta-se límpida eincolor, caso contrário acrescentar 200 µL de H 2 O 2 10% e repetir o procedimento por mais 30minutos. Resfriar os tubos e acrescentar na seqüência:BRANCO TESTE PADRÃOMolibdato de amônio 4,6 mL 4,6 mL 4,6 mLMisturar e adicionar:BRANCO TESTE PADRÃOAcido ascórbico 10 % 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mLMisturar e colocar os tubos em placa de aquecimento na temperatura de 90 ºC por 20minutos. Determinar as absorbâncias do branco, da amostra do teste e dos padrões (4 pontos)em 800 nm acertando o zero do espectrofotômetro com água destilada. Determinar asconcentrações da amostra através da equação da reta construída.