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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO ... - UFRJ

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MATERIAIS E MÉTO<strong>DO</strong>S 46determinando-se a melhor curva de calibração. Cada concentração foi analisada em triplicatae as curvas foram construidas, considerando a média das áreas das duasinjeções contra aconcentração de cada nível de concentração. Foram calculados os desvios padrão e ocoeficiente de correlação.Para a determinação quantitativa por CLAE optou-se pela metodologia do padrãoexterno. Foi preparada uma curva de calibração com o ponto central correspondendo a 400µg/mL, que é a concentração média da curva e a de escolha para se determinar a preparaçãogel com lipossomas contendo <strong>DE</strong>ET e comparamos as áreas dos cromatogramas daspreparações com as áreas dos cromatogramas da curva de calibração, através da equação dareta.As amostras para análise por CLAE foram diluídas a partir das formulações, commetanol P.A. Foram pesadas cerca de 100 mg das preparações, transferidas para balõesvolumétricos de 50,0 mL para cada análise em CLAE, o que corresponde a concentraçãomédia de 400 µg/mL, o volume foi completado com metanol P.A. As amostras depois dediluídas foram filtradas em filtro descartável Milex® de 0,45µ para os suportes de injeção.O equipamento usado para as analises cromatográficas foi o SHIMADZU com bombaperistáltica programável para mistura de até 4 solventes para fase móvel, um modulo detectorprogramável para detecção em vários comprimentos de onda, no nosso caso fixamos ascorridas cromatográficas em três comprimentos de onda: 220, 250 e 270 nm.As análises cromatográficas foram realizadas em coluna Shimpack C18 CLC-ODS(150 mm x 4,6 mm) partículas de cinco micrômetros. A temperatura da coluna utilizadadurante o processo foi a temperatura ambiente.Os componentes da fase móvel foram filtrados em membrana Millipore® de 0,45 µm,separadamente, e a mistura nas proporções desejadas foi realizada pelo módulo de mistura e

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