UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO ... - UFRJ

MATERIAIS E MÉTODOS 37Para o preparo dos lipossomas usados como branco nas dosagens de DEET e testes deeficácia foi seguido o mesmo procedimento, porém sem a adição do DEET. Os lipossomasassim preparados foram mantidos sob refrigeração a 4º C até os ensaios de caracterização.123451- Adição das matérias primas (fosfatidilcolina, colesterol e DEET) solubilizar em CHCl 3 .2- Evaporação em do solvente em evaporador rotatório (2 horas) – formação do filmelipídico.3 - Hidratação do filme lipídico com tampão TRIS (pH= 6,8).4 – Agitação com pérolas de vidro em agitador de tubos.5 – Normalização em membranas de policarbonato.FIGURA 6 – Representação esquemática da formação de lipossomas pelo método dehidratação do filme lipídico.4.5.2 Método do pré-lipossoma.Preparou-se o liposoma a partir de uma mistura pronta de fosfolipídios com outrosadjuvantes (Phosal®) na concentração de 42 mM, que já havia sido deterninada com a melhorproporção para a obtenção de vesículas uniformes e determinação da taxa de incorporação(GARCIA, 1998). Foram pesados 1,030 g de Phosal® e a essa mistura foi adicionado DEETnas proporções de 2,1 mM até 14,7 mM, que correspondem a 5% e 35% de DEET em relaçãoao total de fosfolipídios da preparação. O material de hidratação utilizado foi o tampão TRISpH = 6,8.