CamSep 3 S
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
WYKORZYSTANIE TECHNIK CHROMATOGRAFICZNYCH DO<br />
OKREŚLENIA SKŁADU CUKROWEGO O-POLISACHARYDÓW<br />
WYODRĘBNIONYCH Z WYBRANYCH SZCZEPÓW BAKTERII RODZAJU<br />
CRONOBACTER<br />
Kinga MARSZEWSKA 1* , Małgorzata CZERWICKA 1 , Anna BYCHOWSKA 1 ,<br />
Jadwiga WIŚNIEWSKA 1 , Janusz RAK 2 , Piotr STEPNOWSKI 1 ,<br />
Zbigniew KACZYŃSKI 1<br />
/chromatografia żelowa, chromatografia gazowa/<br />
1 Wydział Chemii, Katedra Analizy Środowiska, Uniwersytet Gdański, ul. Sobieskiego 18/19,<br />
80-952 Gdańsk, * e-mail: kingamarszewska@gmail.com,<br />
2 Wydział Chemii, Zakład Teoretycznej Chemii Fizycznej, Uniwersytet Gdański,<br />
ul. Sobieskiego 18/19, 80-952 Gdańsk<br />
Bakterie z rodzaju Cronobacter są Gram-ujemnymi pałeczkami powszechnie występującymi<br />
w środowisku naturalnym. Izolowano je z najróżniejszych próbek w tym z odżywek dla niemowląt.<br />
Występowanie tych mikroorganizmów w produktach przeznaczonych do konsumpcji dla niemowląt<br />
może stanowić potencjalne źródło zakażeń, a wywołane przez te organizmy choroby<br />
(m. in. zapalenie opon mózgowych, posocznica) mają ciężki przebieg i w konsekwencji mogą<br />
kończyć się śmiercią, w szczególności gdy narażone na nie są wcześniaki [1]. Rodzaj ten zawiera<br />
pięć gatunków: C. sakazakii, C. malonaticus, C. turicensis, C. muytjensii, C. dublinensis. Podziału<br />
tego dokonano na podstawie badań genetycznych nad Enterobacter sakazakii w 2007 roku [2].<br />
Z uwagi na skutki jakie mogą wywoływać zakażenia tymi organizmami, ważnym jest dokładne<br />
poznanie mechanizmu patogenezy tych drobnoustrojów. Pomocne w tym może okazać się ustalenie<br />
budowy powtarzalnej jednostki O-polisacharydów (OPS-ów) izolowanych z ich ściany komórkowej<br />
oraz porównanie tych struktur w obrębie gatunków i szczepów. O-polisacharydy stanowią swoistą<br />
i unikatową część zewnętrznej błony bakterii Gram-ujemnych, tym samym poznanie ich budowy<br />
może przyczynić się do stworzenia podziału chemotaksonomicznego, a w przyszłości stanowić bazę<br />
wyjściową dla stworzenia szybkich testów immunologicznych.<br />
Analizę składu cukrowego O-polisacharydów przeprowadzono dla czterech wybranych<br />
szczepów: C. turicensis NTU 57, C. malonaticus NTU 33, C. sakazakii NTU 696, C. sakazakii<br />
NTU 767. W przypadku wszystkich przedstawionych szczepów bakteryjnych schemat<br />
postępowania był następujący: wytrącony ze ściany komórkowej kompleks lipidowopolisacharydowy<br />
(LPS) poddano hydrolizie z użyciem roztworu 1% kwasu octowego, po usunięciu<br />
części lipidowej, supernatant zawierający poli- i oligosacharydy poddano rozdziałowi<br />
z wykorzystaniem sączenia molekularnego. Dla wyselekcjonowanych frakcji wykonano analizy<br />
z wykorzystaniem techniki magnetycznego rezonansu jądrowego 1 H NMR. Rodzaj i ilość<br />
monosacharydów wchodzących w skład jednostek powtarzalnych OPS-ów ustalono na podstawie<br />
analiz odpowiednich acetylowych pochodnych alditoli z wykorzystaniem techniki chromatografii<br />
gazowej (GC) oraz chromatografii gazowej połączonej ze spektrometrią mas (GC-MS).<br />
Literatura:<br />
[1] J.M. Farber, S.J. Forsythe, Emerging issues in food safety Enterobacter sakazakii, ASM PRESS, Washington, D.C.,<br />
2008.<br />
[2] Iversen C, Lehner A, Mullane N, et al.. The taxonomy of Enterobacter sakazakii: proposal of a new genus<br />
Cronobacter gen. nov. and descriptions of Cronobacter sakazakii comb. nov. Cronobacter sakazakii subsp. sakazakii,<br />
comb. nov., Cronobacter sakazakii subsp. malonaticus subsp. nov., Cronobacter turicensis sp. nov., Cronobacter<br />
muytjensii sp. nov., Cronobacter dublinensis sp. nov. and Cronobacter genomospecies 1. BMC Evol Biol 7: 64, 2007.<br />
46
Change language