CamSep 3 S
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
METODY BADANIA CAŁKOWITEGO POTENCJAŁU<br />
ANTYOKSYDACYJNEGO PRODUKTÓW PSZCZELICH<br />
Elwira LEWCZUK 1 , Katarzyna CIOŁEK 1 , Paweł M. WANTUSIAK 1 ,<br />
Paweł PISZCZ 1 , Iwona KIERSZTYN 1 ,<br />
Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł K. ZARZYCKI 2<br />
/chromatografia cienkowarstwowa TLC/<br />
1 Uniwersytet Przyrodniczo-Humanistyczny, Wydział Nauk Ścisłych, Zakład Chemii Analitycznej,<br />
ul. 3 Maja 54, 08-110 Siedlce, URL: dach.ich.uph.edu.pl, e-mail: psc1@onet.eu<br />
2 Politechnika Koszalińska, Wydział Budownictwa i Inżynierii Środowiska,<br />
Zakład Toksykologii i Bioanalityki, ul. Śniadeckich 2,75-453 Koszalin, e-mail: pkzarz@wp.pl<br />
W ostatnich latach wiele uwagi poświęca się lepszemu poznaniu wpływu wolnych rodników<br />
(WR) i reaktywnych form tlenu (RFT) na organizm ludzki. Wolnym rodnikom przypisuje się<br />
powstawanie wielu chorób zwyrodnieniowych oraz przyspieszanie procesu starzenia. Są one<br />
usuwane z organizmów żywych przez (występujące w owocach, warzywach, miodach czy ziołach)<br />
antyoksydanty i/lub zmiatacze wolnych rodników.<br />
Opracowane przez nas zostały nowe (udoskonalone) metody oznaczania całkowitego<br />
potencjału antyoksydacyjnego (CPA) (i) wykorzystujące reakcję rodnika DPPH z antyoksydantami<br />
i jego oznaczaniu za pomocą chromatografii cienkowarstwowej (TLC) oraz (ii) pomiar powierzchni<br />
pików zarejestrowanych za pomocą różnicowej woltametrii pulsowej (DPV).<br />
W technice TLC zastosowano stabilny rodnik azowy DPPH • (1,1-difenylo-2-pikrylohydrazyl)<br />
którego metanolowy roztwór ma barwę purpurową. W wyniku jego redukcji do DPPH-H, pod<br />
wpływem antyoksydantów zawartych w badanej próbce, roztwór zmienia barwę na żółtą. Miarą<br />
CPA było zmniejszenie się pola powierzchni plamki (piku) rodnika. Próbkę rozwijano na płytce<br />
silikażelowej w układzie heksan:aceton;etanol o stosunku objętościowym 3:1,9:0,1 (v/v/v). Płytkę<br />
skanowano i poddano obróbce przy użyciu programu komputerowego Scion Image. Poprawność tej<br />
techniki sprawdzono przez porównanie wyników uzyskanymi klasyczną metodą fotometryczną z<br />
DPPH (zmiana absorbancji roztworu przy długości fali λ = 517 nm).<br />
Opracowane techniki zastosowano do wyznaczania CPA produktów pszczelarskich. Okazało<br />
się, że TLC można zastosować do pomiarów wartości CPA miodów pitnych. Jest ona dokładniejsza<br />
od fotometrycznej, gdyż pozwala na rozdzielanie ewentualnych barwników obecnych w próbce<br />
mogących fałszować wyniki fotometryczne. Zaletą jej jest również badanie kilku próbek<br />
jednocześnie. Metoda oparta na DPV dostarcza ogólnych informacji o właściwościach<br />
antyoksydacyjnych badanych miodów.<br />
52
Change language