Biochemiepraktikum

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Biochemie Praktikum: Proteinchemie
Versuchsdurchführung [SDS-Page nach U. Laemmli (1970) Nature 227,680-685]
Lösungen:
30% Acrylamid (29,22% Acrylamid 4x, 0,78% Bisacrylamid 4x)
Vorsicht: monomeres Acrylamid ist stark toxisch !
Trenngelpuffer:
18.17 g Tris
(1.5 M Tris / 0.4 % SDS) 4 ml 10 % SDS
mit 6N HCl auf pH 8.8 einstellen
ad 100 ml H 2 O
Sammelgelpuffer:
6.06 g Tris
(0.5 M Tris / 0.4 % SDS) 4 ml 10 % SDS
mit 6N HCl auf pH 6.8 einstellen
ad 100 ml H 2 O
Elektrophoresepuffer:
12 g Tris
57.6 g Glycin ad 1000 ml H 2 O
Elektrophoresepuffer für den Lauf: 125 ml Elektrophoresepuffer
5 ml 10 % SDS ad 500 ml H 2 O
Probenpuffer:
Konz in der Probe
20 ml Glycerin 10 %
10 ml β-Mercaptoethanol 5 %
40 ml 10 % SDS 2 %
25 ml Sammelgelpuffer 0.0625 M ad 100 ml H 2 O
Ammoniumpersulfatlösg. 100 mg ad 1 ml H 2 O (genau wiegen !!)
Proteinstandard: