Schwerpunkt: „Reproduktionsmedizin“ - Tierärztliche Hochschule ...

44
Institut für Lebensmitteltoxikologie und Chemische Analytik der TiHo
Institut für Tierernährung der TiHo
Klinik für kleine Klauentiere und Forensische Medizin und Ambulatorische Klinik der TiHo
Abb. 4 : Mittlere Gehalte an alpha-aktiven und beta-aktiven Estradiol-Equivalenten
in μg EEQ / kg Futter in Proben aus Beständen mit (n=14) und ohne Hyperöstrogenismus
(n=14)
die Zellen lysiert, danach erfolgt die Messung der Lichtblitze, die bei
der Umsetzung von zugesetztem Luciferin durch die Luciferase
gebildet werden (Abb. 3).
Zielsetzung
Ziel der Untersuchungen war zunächst, in einem gemeinsamen Projekt
des Instituts für Lebensmitteltoxikologie und Chemische Analytik,
des Instituts für Tierernährung und der Klinik für kleine Klauentiere
mit dem Reportergen-Assay eine geeignete funktionelle Methode
zu etablieren, mit der ein Nachweis östrogen-aktiver Substanzen
gelingt. Somit können Proben genauer untersucht werden, die im
Zusammenhang mit dem Auftreten von Hyperöstrogenismus stehen,
jedoch keine bzw. keine erhöhten Gehalte an Zearalenon aufweisen.
In einem weiteren Schritt wurden die Phytoöstrogene aus Soja, die
aufgrund ihrer östrogenen Aktivität eventuell Ursache für das Auftreten
des Hyperöstrogenismus sind, konzentriert im Futter gravider
Sauen (eine Woche vor der Geburt) eingesetzt, um experimentell
das Bild des Hyperöstrogenismus bei neugeborenen Ferkeln auszulösen.
Ergebnisse
Untersuchungen von Futtermitteln aus Betrieben mit
und ohne Hyperöstrogenismusproblematik
Es wurden Mischfutterproben aus Betrieben, in denen wiederholt
Tiere hyperöstrogene Effekte zeigten und zugleich Proben aus
Betrieben ohne derartige Störungen mittels des dargestellten
Reportergen-Assays untersucht. Die Vorbehandlung der Futterproben
erfolgte durch eine Flüssig-Flüssig-Extraktion. Die molaren Estradiol-Dosisequivalente
(EEQ) der untersuchten Proben in der Zellkultur
wurden durch mathematische Ableitung aus Funktionsgleichungen
von 17 ß-Estradiolstandardkurven ermittelt und auf μg
EEQ pro Kilogramm Probe umgerechnet. Die mittleren Gehalte der
Estradiol-Equivalente in Futterproben aus Betrieben mit Hyperöstrogenismussymptomen
waren doppelt so hoch wie in Futterproben
aus nicht betroffenen Tierbeständen. Es zeigte sich jedoch ein sehr
inhomogenes Bild in der Verteilung der EEQ-Gehalte, so dass kein
signifikanter Unterschied zwischen Proben aus Betrieben mit
Hyperöstrogenismus und ohne Hyperöstrogenismus besteht. Eine
parallel vorgenommene Untersuchung der Futterproben auf Zearalenon
zeigte nur eine geringe Beteiligung an dem Gesamtgehalt
östrogener Aktivität bzw. es wurde in vielen Fällen trotz hoher EEQ-
Gehalte kein Zearalenon nachgewiesen.
Untersuchungen zur möglichen Auslösung des Hyperöstrogenismus
bei neugeborenen Ferkeln durch experimentell
phytoöstrogen-angereichertes Futter
Die östrogen-aktiven Phytohormone des Sojas wurden konzentriert
in ein Mischfutter für laktierende Sauen eingemischt (10 g Isoflavongemisch
pro Tier und Tag, d.h. im Durchschnitt 43 mg Isoflavone /
kg KM). Nach Feststellung erhöhter östrogener Aktivität des Futters
im Vergleich zu einem Kontrollfutter mittels des Reportergen-
Assays wurde es über eine Woche ante partum an gravide Sauen
verabreicht, um so eventuell das klinische Bild des Hyperöstrogenismus
bei neugeborenen Ferkeln zu provozieren. Die Ferkel zeigten
unmittelbar nach der Geburt klinisch aber nur bedingt und
ansatzweise das „typische Bild“ des Hyperöstrogenismus. Bisherige
Untersuchungen des Kolostrums der Muttersauen lassen nicht
auf eine erhöhte östrogene Aktivität schließen, so dass die Exposition
der Ferkel über das Kolostrum von Sauen, die kurz vor der
Geburt sehr hohe Aufnahmen an Phytoöstrogenen hatten, in Frage
steht.
Ausblick
Das Kolostrum von Sauen, die ein phytoöstrogen-angereichertes
Futter erhielten, scheint bei Ferkeln mit hyperöstrogenen Effekten
nicht der ausschlaggebende Faktor zu sein. Vielmehr ist zu prüfen,
ob der intrauterinen Exposition eine größere Bedeutung zukommt.
Des Weiteren sind auch kritische Expositionszeitpunkte in der Entwicklung
des Ferkels zu berücksichtigen; wirkt sich die Phytoöstrogenbelastung
auf die Ferkel nicht zum Zeitpunkt der Geburt aus, so
kann es dennoch – entsprechenden experimentellen Untersuchungen
an kleinen Labortieren zufolge – zu Entwicklungsstörungen zu
einem späteren Zeitpunkt wie etwa in der Pubertät kommen.