PDF-Datei 812 Kb - Humboldt-Universität zu Berlin

2.2.8.3. Arbeitstechniken
2.2.8.3.1. Ermitteln eines geeigneten Laufmittels (Mikrozirkulartechnik)
Auf einer DC-Platte wird die zu trennende Substanz mehrmals punktförmig im Abstand
von einigen Zentimetern nebeneinander aufgetragen. Danach wird auf das Zentrum
jedes Punktes eine dünne, mit Eluirmittel gefüllte Kapillare (ausgez.
Schmelzpunktröhrchen) aufgetragen. Die austretende Flüssigkeit breitet sich aus und
bewirkt eine Trennung des Substrates. Mischungen, zweier oder mehrerer ineinander
mischbarer Lösungsmittel verschiedener Polarität, ergeben oftmals eine bessere
Trennung als reine Eluirmittel. Die einzelnen Komponenten eines Laufmittelgemisches
dürfen nicht miteinander reagieren, müssen also inert, rein und möglichst leicht zu
verdampfen sein. Verwendet werden immer frisch hergestellte Lösungen, und um
Konzentrationsverschiebungen zu vermeiden, müssen sie verschlossen aufbewahrt
werden.
2.2.8.3.2. Vorbereiten der Trennkammer
Bei ungenügender Kammersättigung zeigt das Chromatogramm ein verzerrtes Bild.
Deshalb wird die Trennkammer allseitig mit Filterpapier ausgekleidet. Das Laufmittel
wird so eingelassen, daß das Filterpapier getränkt ist und die Füllhöhe ca. 1 cm beträgt.
Während einer Wartezeit von etwa 30 min sättigt sich die Atmosphäre in der
Trennkammer mit Laufmitteldämpfen. Der Standort für die Trennkammer muß so
gewählt werden, daß diese nicht einseitig erwärmt oder abgekühlt wird (Durchzug !).
2.2.8.3.3. Vorbereiten der DC - Platte
Die Startlinienmarkierung 1 cm vom unteren Rand der DC-Platte wird mit Bleistift
durchgeführt. Damit das Laufmittel ungehindert und gleichmäßig aufsteigen kann, darf
die Sorbtionsmittelschicht dabei nicht beschädigt werden.
2.2.8.3.4. Auftragen der Probesubstanz
Substanz wird auf die Startlinie der DC-Platte mittels Schmelzpunktröhrchen
aufgetragen.
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