Belastungsinduzierte Veränderungen von Thrombozyten ...

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Zusammenfassung
Eine Zunahme der Zahl zirkulierender Thrombozyten nach körperlicher Belastung ist lang-
jährig bekannt. Indes besteht erhebliche Unstimmigkeit darüber, inwieweit die belastungs-
induzierte Thrombozytose von einer gesteigerten Thrombozytenfunktion begleitet wird und
ob diese mit einem erhöhten Risiko für thrombembolische Ereignisse einhergeht. Unterschiedliche
Methodiken in der Untersuchung von Teilaspekten der Thrombozytenfunktion
(Adhäsion, Aggregation, Sekretion) und wenig vergleichbare Belastungsformen haben erheblich
zu den meist widersprüchlichen Ergebnissen beigetragen. Mit Einführung der Durchflußzytometrie
in die Untersuchung der Thrombozytenfunktion konnten zahlreiche Probleme
gelöst werden. Dennoch ergaben sich auch hier widersprüchliche Ergebnisse und vor allem
hinsichtlich der Probenaufbereitung und Fixierung blieben wichtige methodische Fragen
ungeklärt.
Im Mittelpunkt der vorliegenden Arbeit stand der Aufbau und die Weiterentwicklung einer
durchflusszytometrischen Methodik zur differenzierten Untersuchung der Thrombozytenfunktion
im Rahmen der belastungsinduzierten Thrombozytose. Die Arbeit basiert auf drei
aufeinander aufbauenden Teilstudien bestehend aus einer maximalen Stufentestbelastung
(Teilstudie I), einem submaximalen Dauerlauf über 60 bis 120 Minuten bei einer Intensität
von 90 % der individuellen anaeroben Schwelle (Teilstudie II) sowie einer hochintensiven
Kurzeitbelastung (90 Sekunden all-out; Teilstudie III) und konzentriert sich gemäß dem
Arbeitstitel auf die labormethodischen Aspekte des Untersuchungsganges. Die jeweiligen
Belastungen gewannen dabei eine doppelte Funktion. Zum einen entsprachen sie dem
eigentlichen Untersuchungsgegenstand und zum anderen dienten sie darüber hinaus als
externe Stimuli, um die Sensitivität der Methodik zu erproben.
Mit allen Belastungsinterventionen konnte eine signifikante Zunahme der Zahl zirkulierender
Thrombozyten erreicht werden. Diese ging mit Ausnahme der submaximalen Dauerbelastung
auch mit einer signifikanten Zunahme des mittleren Thrombozytenvolumens einher.
Durch Parallelmessung von unfixierten sowie nachträglich und direkt fixierten Proben in
Teilstudie I konnte gezeigt werden, dass in Folge der Fixierung (Paraformaldehyd) die
Oberflächenexpression der aktivierungsabhängigen Membranproteine CD62P, PAC-1 und
CD41 unterschiedlich stark anstieg, während es gleichzeitig zu einem Rückgang der CD42b
Expression kam. Diese Veränderungen mussten im Sinne einer systematischen Aktivierung
durch die Wirkung der Fixierung gedeutet werden. Unter den direkten Aktivierungsmarkern
erwies sich die Expression von CD62P gegenüber PAC-1 als weniger anfällig für eine
artifizielle Aktivierung in vitro.
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