Belastungsinduzierte Veränderungen von Thrombozyten ...

Einleitung
fehlende Standardisierung erschwert einen Vergleich der Ergebnisse untereinander (106).
Weiterhin besitzt die Methode eine nur schwache Sensitivität für die Bildung von Mikro-
aggregaten, wie sie bevorzugt im Vollblut gefunden werden, während durch die höhere Zell-
konzentration im PRP meist deutlich größere Aggregate bilden (51). Auf die Schwierigkeiten
hinsichtlich einer artifiziellen Aktivierung und den möglichen Zellverlust, die sich aus der
Präparation von PRP ergeben, wurde bereits hingewiesen. Ferner führt auch die Entfernung
der Erythrozyten zu Veränderungen in der Funktionsweise der Thrombozyten (311). Die
Aggregometrie liefert überdies keine Informationen über die tatsächliche Thrombozytenak-
tivität der in vivo. Vielmehr wird durch die zur Aggregationsmessung notwendige Stimulation
letztendlich die Reaktivität der Thromboyzten untersucht. Darüberhinaus wird die Reaktions-
summe aller im PRP gelösten Thrombozyten analysiert. Aussagen zum Funktionsverhalten
einzelner Thrombozyten sind nicht möglich.
Seit der Einführung der Durchflusszytometrie in die Labordiagnostik bietet sich heute eine
moderne und hoch effektive Methodik zur Untersuchung der Thrombozytenfunktion (302).
Mit Hilfe der Durchflusszytometrie können Thrombozyten auf Einzelzellebene untersucht
und innerhalb weniger Minuten einige Tausend Zellen analysiert werden. Der Einsatz von
spezifischen aktivierungsabhängigen Antikörpern bietet dabei die Möglichkeit, einzelne
Teilschritte der Aktivierungsreaktion von Thrombozyten unmittelbar auf der Zelloberfläche
nachzuweisen und so den Funktionszustand der Thrombozyten direkt zu messen (2, 221,
297). So entspricht etwa das Anbinden von CD62P Antikörpern an P-Selektin Rezeptoren auf
der Oberfläche von Thrombozyten dem Nachweis einer abgelaufenen Sekretionsreaktion.
Ebenso erkennen PAC-1 Antikörper den GP IIb-IIIa Rezeptor nur nach aktivierungsabhängiger
Konformationsänderung und belegen damit die bestehende Aggregationsneigung
der Thrombozyten. Durch Zugabe von Agonisten bietet sich ferner die Möglichkeit, neben der
direkten Aktivität der Thrombozyten auch ihre Reaktivität zu untersuchen.
In einer Studie von KESTIN et al. fand die Durchflusszytometrie erstmals 1993 auch in der
Untersuchung der Thrombozytenfunktion während der belastungsinduzierten Thrombozytose
Verwendung (170). Die Autoren beschrieben für untrainierte Normalpersonen eine signifikante
Zunahme der Aktivität und Reaktivität von Thrombozyten in Folge eines Stufentests
auf dem Laufband. Für Trainierte konnten entsprechende Veränderungen hingegen nicht
nachgewiesen werden. Im Gegensatz dazu fanden MÖCKEL et al. auch bei Trainierten eine
signifikante Zunahme der Plättchenaktivität nach einer ebenfalls stufenförmig ansteigenden
Belastung (233). Diese widersprüchlichen Ergebnisse für Trainierte blieben in ihrer Ursache
bislang ungeklärt. Für mäßig trainierte Normalpersonen beschrieben auch WALLEN et al. eine
22