Belastungsinduzierte Veränderungen von Thrombozyten ...

Material und Methoden
Eigenschaften zu stark von der Kernpopulation abwichen, wurden ausgeschlossen und nur die
in Gate (B) eingefassten Blutplättchen zur weiteren Analyse herangezogen (181, 183). Nach
Zählung von 10 000 Thrombozyten in
Gate B wurde die Messung automatisch
gestoppt. Für sie wurden mit Hilfe der
System II TM S
Software die Mittelwerte des
S
C
Vorwärts- und Seitwärtsstreulichtes berechnet.
l
o
g
FSC [log]
Abbildung 10: Validierung der Thrombozyten
aus Gate A (Abb. 9) nach FSC vs. SSC
Abbildung 11 zeigt die Verteilung der Fluoreszenzintensität für den Phycoerythrin konju-
gierten CD41-Antikörper am Beispiel von ruhenden Thrombozyten (a) und nach Stimulation
mit 10 μM TRAP-6 (b). Als Ausdruck der höheren Expression des CD41-Antigens auf der
Plättchenoberfläche nach Stimulation ist die Verteilungskurve für die Fluoreszenzintensität
von PE nach rechts verschoben. In beiden Fällen zeigt sich eine annähernde log-
Normalverteilung einer einheitlichen Zellpopulation. Die Auswertung erfolgte hier durch die
software-gestützte Berechnung der mittleren Fluoreszenzintensität (MFI) für CD41-PE der in
Gate (C) gefassten Thrombozyten (183, 225, 268, 297).
CD41 [log]
CD41 [log]
Abbildung 11: Auswertung mittlere Fluoreszenzintensität (MFI) für CD41-PE
von ruhenden (a) und10µM TRAP-6 stimulierten Thrombozyten (b)
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