Experimentelle Untersuchungen zur Transgenese bei Nutztieren

Methylierungen, Azetylierungen und Phosphorylierungen der Histon-Proteine (Chandler und
Jones, 1988; Bird, 1992; Li, 2002; Maatouk et al., 2006).
Bedingt durch die hohen Kosten für die Erstellung transgener Nutztiere, die erforderliche
umfangreiche Logistik und die langen Reproduktionszeiten, fokussierte sich die Forschung im
wesentlichen auf biomedizinisch relevante Gebiete wie Xenotransplantation und Pharming.
Insbesondere bei Nutztieren, aber auch in der Maus sind die Probleme der Transgenese mit
häufig ungenügender Expression, oder ektopischer Expression nur teilweise verstanden.
Gegenwärtig ist es aufgrund der unzureichenden Vorhersagbarkeit der transgenen Expression,
immer noch notwendig, zahlreiche Linien auf die gewünschten Expressionseigenschaften zu
untersuchen. Bei der Maus stellt das aufgrund der kurzen Generationszeiten und der relativ
geringen Kosten kein grundlegendes Problem dar, bei Nutztieren ergeben sich enorme Kosten
bei der Erstellung und Charakterisierung. Es wird geschätzt, dass die Kosten für die
Erstellung eines transgenen Rindes ca. 100 000 $ betragen, bei Schweinen werden Kosten
von ca. 25 000 $ genannt (Wall, 1996).
A B
Promotor Transgen-cDNA Poly(A)
Abb. 3. DNA-Mikroinjektion in einen Vorkern einer porcinen Zygote.
A) Nach Zentrifugation bei 10 000 g ist die undurchsichtige Lipidfraktion des Zytoplasmas in einer Zellhälfte
konzentriert. In einen der dadurch sichtbar gewordenen Vorkerne wird mit Hilfe einer Mikrokapillare (rechte
Bildhälfte) die DNA-Lösung injiziert. B) Schematische Darstellung eines Minigen-DNA-Konstrukts bestehend
aus einem Promotor, einer protein-kodierenden cDNA und einer Polyadenylierungssequenz, die die Stabilität der
abgelesenen mRNA erhöht.
Daraus ergibt sich, dass für einen breiteren Einsatz der Transgenese bei Nutztieren, die
Effizienz der Transgenese erhöht und die Kosten deutlich sinken müssen. Trotz dieser
Schwierigkeiten sind in den letzten Jahren wesentliche Fortschritte in der Erstellung
transgener Nutztiere erzielt worden.
2.3 Transgene Schweine als Zell- und Organdonoren für die Xenotransplantation
Die Erfolge der Allotransplantation, d.h. die Transplantation humaner Organe in Patienten mit
Organausfall, hat zu einer dramatischen Verknappung der verfügbaren Organe geführt. Selbst
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