Experimentelle Untersuchungen zur Transgenese bei Nutztieren

4.3. Generierung transgener Schwein mit konditioneller Transgenexpression
Über die DNA-Mikroinjektion in einen Vorkern von Schweinezygoten wurden transgene
Linien mit Expression des humanen Komplementregulators CD59 erstellt (Niemann und
Kues, 2003). Als regulative Sequenz wurde der Cytomegalovirus (CMV) Immediate Early-
Promotor gewählt, der als einer der stärksten Promotoren in der Zellkultur gilt.
Abb. 12. Generation transgener Schwein mit Expression von hCD59
A) Minigen-Konstrukt mit hCD59 cDNA, B) Injektion des aufgereinigten Konstruktes in einen Vorkern einer
Schweinezygote, C) Transgenes F0-Tier, D) Organspezifische Expression von hCD59 in einem F1-Tier, E)
Nachweis von hCD59 auf der Zelloberfläche von porcinen Fibroblasten und Endothelzellen, F) funktioneller
Nachweis von hCD59 in Schweinefibroblasten durch verminderte Lyse durch Humankomplement, G)
funktioneller Nachweis von hCD59 in einem Nierenperfusionsystem mit Humanblut (aus Niemann und Kues,
2003).
Es wurden 5 Linien transgener Schweine mit diesem Konstrukt etabliert. Abb. 12 fasst die
Ergebnisse aus der Linie 5 zusammen. Bei Expressionsuntersuchungen zeigte sich, dass eine
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