Manual de bioseguridad - Acta Sanitaria

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3. RECURSOS DEL LABORATORIO 3.2. CABINAS DE SEGURIDAD BIOLÓGICA. DEFINICIÓN. TIPOS Sí ¿Tienen un riesgo superior por haber sido modificadas genéticamente o infectadas con patógeno? ¿Están las células bien caracterizadas? Sí No No Clase de riesgo 1 Nivel de contención 1 Clase de riesgo 2 Mínimo nivel de contención 2 II. Por tanto, la selección de la cabina de seguridad biológica a utilizar dependerá de la actividad que se esté desarrollando en el laboratorio de investigación. Selección de las cabinas de seguridad biológica Selección de cabina de seguridad biológica. Clase I La selección del empleo de una cabina de seguridad biológica del Tipo I va a depender de: ¿Las cálulas son de origen humano o primate? No ¿Libres de patógeno? Sí ¿Tienen un riesgo superior por haber sido modificadas genéticamente o infectadas con patógenos? No Clase de riesgo y nivel de contención Depende del agente patógeno o de la modificación genética Sí i • Agentes biológicos. Aquéllos pertenecientes a los grupos de riesgo 1 y 2 según la propuesta de la Directiva anteriormente citada. • Otros compuestos. Este tipo de cabina puede ser usado para operaciones que impliquen la manipulación de compuestos químicos tóxicos y/o cancerígenos siempre y cuando se modifique el sistema de tratamiento del aire expulsado mediante filtros HEPA, y elementos que aseguren la limpieza del aire expulsado (filtros de carbón activo, convertidores catalíticos, incineradores, etc.). ¿Tienen un riesgo superior por haber sido modificadas genéticamente o infectadas con patógeno? Sí Clase de riesgo 1 Nivel de contención 1 Figura 11. Esquema para contención biológica según el cultivo celular que se esté utilizando. (Fuente de la Universidad de Barcelona) TABLA 6. Elección del nivel de contención según el cultivo celular Siempre se tendrá en cuenta que muchas de las operaciones que se realizan en el laboratorio se quieren realizar en un ambiente estéril y que este tipo de cabinas no lo proporcionan, puesto que el aire es tomado del ambiente de trabajo y no recibe ningún tratamiento. Selección de cabina de seguridad biológica. Clase II La selección de este tipo de cabina será por: CULTIVO CELULAR Líneas celulares bien caracterizadas de origen humano o de simios. Líneas celulares no humanas ni de simios bien caracterizadas con bajo riesgo de infección endógena con patógenos humanos. Líneas celulares o cepas no totalmente caracterizadas o autentificadas. CONTENCIÓN Nivel de contención 2 y empleo de cabina de bioseguridad. Nivel de contención 2 y empleo de cabina de bioseguridad. i • Agentes biológicos. Todos aquellos agentes pertenecientes a los grupos 1 y 2. Algunos autores incluyen los agentes pertenecientes al grupo 3. • Otros compuestos. En general, estos tipos de cabinas pueden ser utilizados para la manipulación de compuestos químicos de alta toxicidad siempre y cuando se modifique el sistema de tratamiento del aire expulsado según lo indicado anteriormente. Células con patógenos endógenos y células deliberadamente infectadas. Células sanguíneas humanas, células linfoides, tejido nervioso de origen humano o simio. Contención apropiada al patógeno. Contención apropiada al riesgo potencial. La instalación eléctrica de la cabina debe estar convenientemente protegida (MIE-026 del REBT; Ministerio de Industria y Energía, Reglamento Electrotécnico de Baja Tensión). 60 61
3. RECURSOS DEL LABORATORIO 3.2. CABINAS DE SEGURIDAD BIOLÓGICA. DEFINICIÓN. TIPOS Selección de cabina de seguridad biológica. Clase III La selección de este tipo de cabina será en base a: III. Recomendaciones para el uso de cabinas de seguridad biológica Materiales y equipos i O • Agentes biológicos. Todos aquellos agentes pertenecientes a los grupos 3 y 4. • Otros compuestos. Este tipo de cabinas puede ser utilizado para la manipulación de compuestos químicos tóxicos y/o cancerígenos, siempre y cuando se modifique el sistema de tratamiento del aire expulsado según lo indicado anteriormente. • Se recomienda ubicar el material necesario para el trabajo en el interior de la cabina antes de empezar a trabajar. De este modo se evita que nada pase hacia dentro o hacia fuera de la misma hasta que el trabajo haya terminado. Siempre dentro de un orden, intentando no invadir toda la superficie, evitando acumulaciones innecesarias. • Es recomendable que el material a introducir en la cabina esté libre de partículas, por ello debería limpiarse cuidadosamente antes de su introducción en la misma ya que de otro modo se pueden producir contaminaciones en los cultivos celulares. • Es preferible utilizar tubos y/o frascos con tapones de rosca en lugar de tapones de algodón, ya que éstos desprenden fibras. • Todos los productos de desecho como placas de cultivo, medios de cultivo, muestras, etc., se sacarán de la cabina en recipientes impermeables y aptos para ser esterilizados en su caso y si no se eliminarán en los recipientes adecuados. Cuando sea preciso se tratará con lejía. • No es recomendable el uso de mecheros Bunsen o similares, pueden provocar desviaciones y turbulencias del flujo laminar y quemar los filtros HEPA. Es recomendable el uso de microincineradores eléctricos para la esterilización. • No se deben utilizar las cabinas como almacén de materiales y equipos de laboratorio. • No es aconsejable introducir en la zona de trabajo materiales que emitan fácilmente partículas tales como: papel, madera, cartón, lápices, goma de borrar, etc. Procedimiento de trabajo O Se tendrá que tener procedimientos de trabajo por parte del personal de laboratorio que aseguren un buen uso dentro de las cabinas de seguridad biológica minimizando los posibles riesgos. Entre ellos se encontrarían: • Realizar movimientos lentos de brazos y manos en el interior de las cabinas para evitar crear corrientes de aire que rompan la laminaridad del flujo y pueden provocar la entrada o salida de contaminantes transportados por el aire. • Se deben evitar manipulaciones cerca de la superficie de trabajo, ya que el aire al chocar con la superficie se desplaza horizontalmente pudiendo recoger la contaminación depositada sobre la misma. • Se recomienda trabajar entre 5 y 10 cm sobre la mesa de la cabina, y por detrás de la “zona de partición de humos” que es aquella zona en la que el aire estéril descendente se divide para seguir su recorrido a través de las rejillas anterior y posterior de las cabinas de Clase II. Los movimientos se realizarán hacia el interior de la cabina. La zona de menor seguridad para el trabajador y el producto son los 8 cm más próximos a la abertura frontal. • A fin de preservar al máximo los filtros HEPA deben evitarse los golpes, la proyección de líquidos o salpicaduras, perforaciones, etc., contra la rejilla de protección del mismo. • Es recomendable la puesta en funcionamiento de la cabina unos 15-30 min antes del inicio del trabajo. Así mismo debe mantenerse en funcionamiento durante un tiempo prudencial después de finalizado el trabajo. En algunos laboratorios recomiendan el funcionamiento continuado de las cabinas para conseguir su óptimo rendimiento e incluso para evitar contaminaciones. • Se recomienda esperar de 2 a 3 min antes de empezar a trabajar, cuando se haya introducido algún material en el interior de cabinas dotadas del flujo laminar. Ello dará lugar a que éste se reconstituya y purifique la posible contaminación transportada del exterior a la zona de trabajo estéril. • En la zona de trabajo sólo debe introducirse el material verdaderamente necesario y de uso inmediato. Preferiblemente se colocará de modo que se eviten movimientos innecesarios en el interior de la cabina. • No deben colocarse objetos entre el filtro HEPA y el área en que se vaya a trabajar, puesto que se producirán sombras y turbulencias. Hay que tener en cuenta que la laminaridad del flujo de aire no vuelve a recuperarse hasta una distancia de 2,5 veces el diámetro del objeto interpuesto. 62 63
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