Evaluación de la inmunogenicidad y la capacidad protectora de la ...

ResultadosDe la columna de intercambio iónico, eluyeron fracciones con actividad enzimática (Figura2). Las fracciones se unieron según el perfil obtenido en tres mezclas y a su vez fueronpurificadas por filtración en gel. Durante este paso, no se observó un incremento apreciablede la actividad específica, y la actividad enzimática disminuyó a la mitad de la obtenidahasta esa etapa. Se obtuvieron fracciones activas que correspondieron a pesos molecularesde 62, 40 y 29 kDa (datos no mostrados). En la figura 3 aparece solo reflejado el perfil deactividad enzimática de la proteinasa de 62 kDa por filtración en gel.azocaseínaUA35A 2804.512.54Figura 2. Perfil de actividad enzimática de antígenos de excreción – secreción de T.vaginalis después de realizada la Cromatografía de Intercambio Iónico. 3.52Los ensayos enzimáticos de las fracciones se realizaron a pH 7,0 con el3sustrato azocaseína, las mezclas de reacción se incubaron a 37 o C por 3 horas y las1.5 lecturas se realizaron a 366 nm.2.50.5211.5mg de azocaseína / h / mL Ez0.500 25 50 75volumen de elución (mL)Figura 2. Perfil de actividad enzimática de antígenos de secreción de T. vaginalisdespués de realizada la cromatografía de intercambio iónico (gradiente lineal 10-500mmol/L de NaCL).Los ensayos enzimáticos de las fracciones se realizaron a pH 7,0 con el sustratoazocaseína, las mezclas de reacción se incubaron a 37 o C por 3 horas.UA. Unidades arbitrarias.10010.50[NaCL] mol / LAbsorbancia a 280 nm066