Evaluación de la inmunogenicidad y la capacidad protectora de la ...

Resultados212 kDa170 kDa116 kDaPM______76 kDa__53 kDa__ABFigura 9. Moléculas identificadas por los AcMs 4D8 y 1A8 en antígenos de secreción de T.vaginalis.El análisis fue realizado por inmunotransferencia. Se utilizaron marcadores de peso molecular en el rangode 53 y 212 kDa. Los AcMs fueron utilizados a la concentración de 500 g/mL. A) representa al AcM4D8 y B) al AcM 1A8. El conjugado anti-IgG de ratón-peroxidasa se utilizó a la dilución de 1/1000.Con el propósito de hacer el estudio de los epitopos reconocidos por los AcMs, a partir deantígenos de secreción de T. vaginalis se purificaron las moléculas reconocidas por el AcM4D8 por cromatografía de afinidad utilizando como ligando el propio AcM.EL tratamiento con calor de estos antígenos purificados provocó un cambio significativo enel reconocimiento de los epitopos por los AcMs 4D8 y 1A8. A la temperatura de 37 ºC seobservó una ligera disminución en los valores de absorbancia en la primera hora deincubación. Sin embargo, un decrecimiento brusco fue observado a las temperaturas de 65y 80º C con 30 minutos de incubación, lo que sugiere la naturaleza peptídica de estosepitopos y la existencia de una conformación que se pierde con la exposición al calor(Figura 10).79