TC BALIKES R ÜN VERS TES FEN BL MLER ENST TÜSÜ B YOLOJ ...
TC BALIKES R ÜN VERS TES FEN BL MLER ENST TÜSÜ B YOLOJ ...
TC BALIKES R ÜN VERS TES FEN BL MLER ENST TÜSÜ B YOLOJ ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
akteriler için bir antibiyotik olan kloramfenikol, Candida albicans için ise standart<br />
antifungal madde olan ketakonazol kullanılmıştır. Bu işlem tüm kuyucuklara<br />
uygulandıktan sonra mikroorganizmaların eklenmesi işlemine geçilmiştir. Bunun<br />
için önceden bulanıklığı Mc Farland No: 0,5 ’e göre ayarlanan mikroorganizma<br />
kültürleri yarım saat 37 o C’de bekletilerek her satıra bir mikroorganizma gelecek<br />
şekilde (11 ’inci sütun hariç) 100 ’er µl ilave edilmiştir. Bu işlemden sonra<br />
mikrodilüsyon petrilerinin kapakları kapatılarak uygun inkübasyon sıcaklığında 24<br />
saat inkübe edilmiştir. İnkübasyon süresi sonunda kuyucuklar da üremenin varlığı<br />
yada yokluğunun tespit edilebilmesi amacıyla mikrodilüsyon petrileri üzerine<br />
tetrazolium violet çözeltisi püskürtülmüştür. Bu işlemin sonunda renklenmenin<br />
olması için 37 o C ’de 30 dakika daha inkübasyona bırakılmıştır. İnkübasyonun<br />
sonunda renklenmenin olmadığı ilk kuyucukların sahip olduğu konsantrasyonlar<br />
MİK (Minimum İnhibisyon Konsantrasyonu) olarak değerlendirilmiştir. MİK<br />
değeri, antimikrobiyal maddenin mikroorganizmaların üremesini durdurmak için<br />
gerekli en düşük konsantrasyon değeri olarak ifade edilebilir.<br />
2.2.2.3 Antifungal Aktivite<br />
Antifungal aktivite çalışmaları içinde agar disk difüzyon metodu<br />
kullanılmıştır. Konidi elde edebilmek amacıyla saprofitik funguslardan Aspergillus<br />
flavus, A. niger, Penicillium expansum Czapek Dox Agar (CDA) besiyerinde ve<br />
Alternaria brassicola Malt Ekstrakt Agar (MEA) besiyerinde, 90 mm çapında petri<br />
kapları kullanarak 25 o C’de 7 - 10 gün süreyle geliştirilmiştir. Daha sonra iğne<br />
yardımıyla gelişmiş kolonilerden sporlar alınarak, Czapek Dox Agar ve Malt<br />
Ekstrakt Agar besiyeri içeren petri kaplarının merkezine uygulanmıştır. Her birine<br />
stok çözeltiden 20 µl emdirilen diskler, ekim yapılan noktaların üstüne<br />
yerleştirilmiştir. Petri kapları 7 gün süresince 25 o C’de inkübasyona bırakılmıştır.<br />
İnkübasyon sonunda, uçucu yağların fungus sporlarından gelişen koloniler<br />
üzerindeki % inhibisyon değerleri; % İnhibisyon = 100.(C-T)/C formülüne göre<br />
hesaplanmıştır [123].<br />
C: Kontrol petrisinde gelişen fungusun koloni çapı,<br />
T: Test petrisinde gelişen fungusun koloni çapı<br />
46
Change language