ВВЕДЕНИЕ В БИОТЕХНОЛОГИЮ - БГУ. Сайт биологического ...

Химический состав каллусной ткани и ткани органа, из которого она
получена, как правило, различается. Каллусные ткани, выращиваемые
поверхностным способом, часто применяются для поддержания в
растущем состоянии коллекций различных штаммов, линий, мутантов; из
них получают суспензии клеток для культивирования в жидкой
питательной среде, а также для регенерации растений.
Культуры клеток растений, выращиваемые в жидкой питательной
среде, обычно называют суспензионными культурами, хотя этот термин,
строго научно говоря, не отражает поведение клеток при таком способе
культивирования.
Отдельные клетки, а также небольшие их группы или достаточно
крупные агрегаты (несколько десятков клеток) выращиваются во
взвешенном состоянии в жидкой среде при использовании различных
аппаратов и методов поддержания их в таком состоянии. Начальный
момент при получении суспензионных культур клеток в известной
степени является событием случайным, поскольку только те клетки,
которые в силу каких-то причин оказались способными к перестройке
метаболизма и эффективному размножению в данных конкретных
условиях, дают начало "хорошим" линиям. Важной особенностью клеток
таких линий является их высокая степень дезагрегации (не более 5–10
клеток в скоплении агрегате), морфологическая однородность (небольшие
размеры, сферическая или овальная форма, плотная цитоплазма), а также
отсутствие трахеиподобных элементов.
Культивирование клеток растений в жидкой среде имеет ряд
преимуществ перед выращиванием поверхностным способом каллусных
культур. В условиях жидкого культивирования значительно легче влиять
на метаболизм и рост клеточных популяций различного рода экзогенными
факторами. Суспензионные культуры намного удобнее для
биохимических и молекулярно-биологических экспериментов – изучения
индукции ферментов, процессов экспрессии генов, изолирования и
характеристик получаемых мутантов и т. п.
Клетки для суспензионных культур получают из каллусных тканей,
помещая последние в жидкие питательные среды и подвергая их
перемешиванию с помощью разнообразных качалок или встряхивателей.
Суспензионную культуру можно получить и из растительных тканей,
однако это более трудоемкий путь, требующий большего времени. Клетки
экспланта при этом способе должны сначала образовать первичный
каллус, и лишь после попадания возникших на поверхности каллусных
96