ABSTRACTS

34. Jahrestagung der Deutschen Plastischen Chirurgen
8. Jahrestagung der Deutschen Ästhetisch-Plastischen Chirurgen
Ergebnisse: Die histologische Analyse der gedehnten Sehnenkonstrukte
zeigte Sehnen-ähnliche Strukturen mit spindelförmigen Zellen, die longitudinal
orientiert waren, einer organisierten Matrix und parallelen Kollagenfasern.
In der Kontrollgruppe waren keine Sehnen-ähnlichen Strukturen
vorhanden. Bei der PCR-Analyse war die Genexpression von Kollagen
Typ I, III und Fibronektin bei den gedehnten Konstrukten erhöht.
Immunhistochemische Analysen zeigten eine vermehrte Synthese von
Kollagen Typ I und Fibronektin.
Schlussfolgerung: In der vorliegenden Studie konnten lange Sehnenkonstrukte
aus hMSCs und einem Kollagen Typ I Gel durch zyklische
Dehnung in vitro hergestellt werden. Die Konstrukte zeigten Sehnenähnliche
Strukturen. Ob die vorgestellte Methode ein Potential für die
zukünftige klinische Anwendung bei der Rekonstruktion von Sehnenverletzungen
hat, werden weiterführende Studien zeigen.
V18 Tissue Engineering von Fettgewebe durch Kultivierung
humaner Präadipozyten und Endothelzellen
F.T. Tegtmeier, N. Torio-Padron, M. Müller, G.B. Stark, J. Borges
Klinikum der Albert-Ludwigs-Universität Freiburg, Abteilung für Plastische und Handchirurgie
Die erfolgreiche Transplantation von Fettgewebe ohne Gefäßanschluss
bleibt eine Herausforderung in der Plastischen Chirurgie. Die Formation
von Neo-Fettgewebe durch Tissue Engineering Strategien bietet hier
Lösungswege zur Bereitstellung von Weichteilgewebsäquivalenten. Das
Spektrum klinischer Indikationen ist breit gefächert und reicht von
rekonstruktiven Maßnahmen bis hin zur ästhetischen Anwendung.
Methodik: Primärkulturen humaner Präadipozyten wurden aus subkutanem
Fettgewebe isoliert. Die in vitro Kultivierungsbedingungen wurden
durch Variation der Kulturoberfläche (Gelatine, Kollagen, Fibronektin)
und Supplementierung des Kulturmediums mit verschiedenen Wachstumsfaktoren
(EGF, bFGF, VEGF, PDGF) optimiert. Darüber hinaus
wurde die Kokultivierung von Präadipozyten mit humanen dermalen
mikrovaskulären Endothelzellen (HDMVEC) studiert. Verschiedene
injizierbare Trägermatrizes (Fibrinkleber, Kollagengel, Hyaluronsäure)
wurden auf ihre Eignung zur Kultivierung von Präadipozyten in vitro
getestet und ihr Einfluss auf Zellproliferation und -viabilität mittels MTS-
Assay und phasenkontrastmikroskopischer / histologischer Beobachtung
untersucht. In einer in vivo Studie wurden mit Präadipozyten besiedelte
Fibrinmatrizes unterschiedlicher Fibrinogenkonzentration durch subkutane
Injektion in BALB’c athymische Nacktmäuse transplantiert. 4, 7,
14 und 28 Tage post transplantationem wurde die Vaskularisierung, Biomatrixresorption
und Fettgewebsformation der Zell-Matrix-Konstrukte
durch Immunhistochemie (HLA, CD 31) und konventionelle Färbungen
(HE, Ölrot-O) untersucht. Ferner wurde die Matrixstruktur und Zellfläche
histomorphometrisch ausgewertet.
Ergebnisse: Ein neues Medium zur Kokultivierung von humanen Präadipozyten
und HDMVEC wurde entwickelt und die In-vitro-Kulturbedingungen
für Präadipozyten optimiert. Mit einer Fibrinmatrix niedriger
Fibrinogen- und Thrombinkonzentration wurde eine geeignete Trägermatrix
für die Kultivierung von Präadipozyten in vitro gefunden. In vivo
konnte die Formation einer dünnen Lage HLA-positiven, vaskularisierten
Fettgewebes 4 Wochen post transplantationem nachgewiesen werden.
Zusammenfassung: Die Kultivierungsbedingungen für Präadipozyten in vitro
konnten nachhaltig verbessert werden. Darüber hinaus wurde der Einfluss
der Porosität und Fibrillendicke der Fibrinmatrixstruktur durch
Variation der Fibrinogen- und Thrombinkonzentration auf inokulierte
Präadipozyten gezeigt. Die Möglichkeit zur In-vivo-Herstellung von
Weichteilgewebsäquivalenten zur Gewebsaugmentation, basierend auf
mit humanen Präadipozyten besiedelten Fibrinmatrizes, konnte demonstriert
werden.
Plastische Chirurgie 3 (Suppl. 1): 9 (2003)
V19 Amniozyten Engineering zur Optimierung der Verschlußmethodik
der fetalen Membranen nach
intrauterinem Eingriff am mittelträchtigen Kaninchenmodell
N. Papadopulos, S. Klotz, J. Henke, M. Föhn, M. Klöppel,
D. Müller, L. Kovacs, H. Horch, B. Gänsbacher, E. Biemer
Abteilung für Plastische u. Wiederherstellungschirurgie,
Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München
Die weitverbreitete Anwendung von hochauflösendem Ultraschall erlaubt
heute eine sorgfältige und frühe Diagnose von angeborenen Fehlbildungen.
Einige davon können chirurgisch korrigiert werden. In bestimmten
Fällen könnte die intrauterinen Chirurgie funktionelle und ästhetische
Vorteile bringen bzw. sogar lebensrettend sein. Aufgrund der extremen
Empfindlichkeit des fetalen Patienten und der fetalen Membranen erfüllen
zur Zeit nur wenige Fehlbildungen die Kriterien zur Durchführung der
intrauterinen Chirurgie. Die Liste könnte sich jedoch in der Zukunft
ändern, da die pränatale Diagnostik, die technischen Fortschritte und die
pathophysiologische Kenntnisse sich stetig weiter verbessern. Zusätzlich
stellt die seit kurzem entwickelte endoskopische fetale Chirurgie eine neue
schonendere Möglichkeit für die intrauterine Chirurgie dar. Endoskopische
Eingriffe könnten Nachteile der offenen intrauterinen Chirurgie vermeiden
und somit die Operationen am Fetus sowohl bei lebensbedrohlichen
als auch bei nicht lebensbedrohlichen Fehlbildungen wie am Beispiel
der Myelomeningozele oder auch der Kraniofazialen Malformationen
sicherer machen. Jedoch bleibt die Morbidität aufgrund der vorzeitigen
Ruptur der fetalen Membranen (PROM) weiterhin hoch und somit als der
wichtigste hemmende Faktor für die breite Anwendung der intrauterinen
Behandlung angeborener Fehlbildungen.
Um den Verschluss der fetalen Membranen und derer Heilung nach iatrogener
Traumatisierung zu erforschen, wurde 1998 das Kaninchenmodell
entwickelt. In diesem Modell konnten wir in unserem letzten Serie nicht
nur einen funktionellen, sondern auch einen anatomischen Verschluss der
fetalen Membranen nachweisen. Trotz allem zeigte unsere beste Gruppe
immer noch eine 30%ige PROM-Rate. Zusätzlich ist es uns gelungen im
Labor Amniozyten aus entnommenen Kaninchen-Amnionmembran zu
züchten.
Diese Arbeit fasst kurz die Daten aus der offenen und endoskopischen fetalen
Chirurgie über die Behandlung von typischen angeborenen Fehlbildungen
beim Menschen zusammen und stellt unser weiterentwickeltes
Tiermodell zur Erforschung chirurgischer Verschlussmethoden fetaler
Membranen nach Fetoskopie vor. Dazu sind die in vitro gezüchteten
Amniozyten zum Verschluss der iatrogen traumatisierten fetalen Membranen
nach Fetoskopie und in Kombination mit Fibrinkleber und Nähte
verwendet um die Verschlussmethode der Wahl erzielen zu können. Erste
Erfahrungen mit diesen Methoden werden vorgestellt und diskutiert, da
nur in solchen Konditionen in der Zukunft den humanen Fetus mit einer
nicht lebensbedrohliche kraniofaziale Fehlbildung klinisch helfen könnten.
V20 Die Wirkung des Bakterientoxins C3 auf die
Regenerationsfähigkeit des peripheren Nervensystems –
Erste Ergebnisse
E. M. Lang, H. Atas, B. Munder, B. Müller, K. Aktories, J. Borges, G.B. Stark
Klinikum der Albert-Ludwigs-Universität Freiburg, Abteilung für Plastische und Handchirurgie
Abstracts
Obwohl das Regenerationspotential des peripheren Nervensystems weitaus
besser ist als das des Zentralen Nervensystems, sind Qualität und
Geschwindigkeit der Regeneration oftmals unzureichend.
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